24小时热门版块排行榜    

查看: 2221  |  回复: 3

肖颖2009

铁虫 (正式写手)


[交流] 测序正确了,为什么不能表达呢?

psv2-DHFR载体自身没有带信号肽,加上一个EPO的分泌信号肽。载体改造好后也连GFP验证过了,可以发光,但不知道为什么连了一个目的蛋白就是不表达呢?大家有没有遇到此类情况?目的片段测序是正确的哦,连其他载体是可以表达的。非常困惑~~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangtao89hf

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主做的可是通过双酶切将一段基因,与相同双酶切的绿色荧光蛋白质粒连接。新构建的质粒?求指导一下
2楼2013-07-06 15:46:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yeyu541200

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
是不是连上目的片段之后   序列移码了   有的时候在设计引物的时候得在前面加上适当数量的碱基,才能正确的表达,我知道PEGFP-N载体加DNA片段的时候,得在片段前加一个碱基!
3楼2013-07-06 18:20:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yeyu541200

新虫 (小有名气)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
肖颖2009: 金币+1, 谢谢~! 2013-07-09 14:12:06
引用回帖:
3楼: Originally posted by yeyu541200 at 2013-07-06 18:20:34
是不是连上目的片段之后   序列移码了   有的时候在设计引物的时候得在前面加上适当数量的碱基,才能正确的表达,我知道PEGFP-N载体加DNA片段的时候,得在片段前加一个碱基!

哦   错了  不是在前面  是 在片段后面加一个碱基   GFP荧光蛋白才表达  不加   后面的序列就 移码了  不发荧光      你用软件先连上片段看看能不能正确翻译
4楼2013-07-06 18:28:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 肖颖2009 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +3 Ldrop2023 2026-08-13 3/150 2026-08-14 14:07 by gltch
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +19 医学老男孩 2026-08-13 43/2150 2026-08-14 13:34 by 医学老男孩
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +5 启萌科技 2026-08-12 13/650 2026-08-14 10:53 by lnjx2024
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
信息提示
请填处理意见