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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » western blot 一抗孵育时用多少ml啊
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yuhan131481

铁虫 (小有名气)

[求助] western blot 一抗孵育时用多少ml啊

现在在做western blot ，膜有胶的一半大吧    一抗孵育时用8ml孵育   师姐一直说用1.5ml就好了    说我浪费抗体    求指教
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1楼 2013-07-03 00:02:49
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yuhan131481

铁虫 (小有名气)
★
silicare: 金币+1, 杂交袋的确省抗体，不过也要让抗体在封口后能很好的流动才行，否则影响效果。 2013-07-04 15:47:05
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-03 00:07:17
要看你的膜的面积有多大，还有就是膜放在什么里面孵育。一般来说，体积大一点效果会好一些。因为一抗、二抗一般都是过量的，我们实验室的一抗都是反复使用的。

你好 我们是在杂交袋里边儿孵育的  我的膜有3cm×9cm吧   我们实验室其他博士建议我用8ml   说1.5ml都太少了    想听下您的建议
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5楼2013-07-03 10:21:27
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
137167741: 金币+2, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-07-03 07:20:17
要看你的膜的面积有多大，还有就是膜放在什么里面孵育。一般来说，体积大一点效果会好一些。因为一抗、二抗一般都是过量的，我们实验室的一抗都是反复使用的。
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2楼2013-07-03 00:07:17
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
137167741: 金币+2, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-07-03 07:20:24
可以把膜卷进一个50ml 的管子里面, 膜的背面会贴住管壁的, 然后让管子滚动. 这样可以用很少体积的孵育溶液.
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3楼2013-07-03 00:39:06
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zhouking8758

木虫 (正式写手)
★ ★
137167741: 金币+2, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-07-03 07:21:01
实验室这么节约啊。。。。。。
无论多大体积，只要能有浸透膜就可以了
你们师姐建议1.5ml，可以参考啊。毕竟她这么做成功做。
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4楼2013-07-03 00:57:12
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