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张鑫锎

新虫 (初入文坛)

[求助] 酵母基因敲除 同源臂一直P不出来

我在KEGG上查的基因序列,要敲除掉,大概1500bp左右,我在左边的700bp范围内P左臂,在右边700bp范围内P右臂,右臂一次就P对了,左臂P了好多次了,长度一直不对,应该是600左右,P出来总是1200左右。我想知道KEGG上关于酵母的基因序列带有内含子么,是内含子搞的鬼么。
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猫di阁楼

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

应该不是内含子的问题
你用BLAST查一下是不是你的引物和其他位置互补
可能是和其他部分产生互补后扩增除了非特异片段
我也是做酵母敲除
有什么经验可以多联系~
祝好运
2楼2013-11-12 19:21:44
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