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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 缓冲溶液制备细节
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路二姐LEFT

新虫 (初入文坛)

[求助] 缓冲溶液制备细节

哪位大神给解释一下下面两个缓冲溶液的配制区别，到底是磷酸一氢钠还是磷酸二氢钠，还是磷酸钠，还是磷酸，调pH用的啥，
A PBS buffer ( 100 m M Na2HPO 4,0.3MNaCl, 5mMMgCl2, 1 mM EDTA, pH = 7 .4) was u sed for all DNA arrayfabrication.
A p hosphate buffer ( 0.1 M NaCl, 10 m M sodium phosphate, p H = 7.4) was used f or DNA/DNA and DNA/RNA hybrid ization m easurements.
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1楼 2013-06-30 15:58:33
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myprayer

专家顾问 (著名写手)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-06-30 16:18:03
1949stone: MolEPI+1, good 2013-07-01 07:44:52
楼主，你说的是参考文献里面的吗？我们实验室一般都是这个样子做的，
不知道对你有没有帮助我先说下

PBS的制备与消毒(也可用于其它BSS，如：Hanks，D-Hanks液的配制)：
1.溶解定容：将药品（NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2HPO4·H2O 1.56g，KH2PO40. 2g ）倒入盛有双蒸水的烧杯中，玻璃棒搅动，充分溶解，然后把溶液倒入容量瓶中准确定容至1000ml，摇匀即成新配制的PBS溶液。
2.移入溶液瓶内待消毒：将PBS倒入溶液瓶（大的吊针瓶）内，盖上胶帽，并插上针头放入高压锅内8磅消毒20分钟。注意高压消毒后要用灭菌蒸馏水补充蒸发掉的水份。
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2楼2013-06-30 16:13:23
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路二姐LEFT

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by myprayer at 2013-06-30 16:13:23
楼主，你说的是参考文献里面的吗？我们实验室一般都是这个样子做的，
不知道对你有没有帮助我先说下

PBS的制备与消毒(也可用于其它BSS，如：Hanks，D-Hanks液的配制)：
1.溶解定容：将药品（NaCl 8.0g，KCl 0. ...

文献里的，想做这方面的实验，参考他的缓冲液，但是他的第一个缓冲液配方没有磷酸二氢钠，第二个缓冲液的配方也没说…，我主要是想知道第二个缓冲液，要用它做DNA/RNA、DNA/DNA在一个体系中杂交！
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3楼2013-06-30 16:19:26
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透明的玻璃杯

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1949stone: MolEPI+1, 鼓励分享经验 2013-07-01 07:45:42
在同一个pH 条件下，不管你加的是磷酸一氢钠还是磷酸二氢钠，还是磷酸钠，还是磷酸，最终的离子形式都是一致的。一般而言，如果你用的是磷酸盐，你用HCl调PH，只会有少量NaCl增加。如果你用磷酸二氢钠,则用NaOH, 除了水不增加其他物质。
事实上，杂交试验没有那么敏感，不过第二 个  如果有EDTA的话，我会更喜欢
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皇帝诞生地
4楼2013-06-30 20:52:11
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1949stone: MolEPI+1, 同意 2013-07-01 07:46:07
两个缓冲液的主要差别在于盐的浓度和种类不同，而且第一个缓冲液里含有EDTA。关于磷酸盐缓冲液的配置，可以参考分子克隆实验指南的附录，用磷酸氢二钠和磷酸一氢钠按照一定体积比例混合配置。这两个缓冲液的具体配置方法是配好磷酸盐母液、5M NaCl, 1M MgCl2, 0.5M EDTA的母液，然后按照比例稀释配置而成。
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5楼2013-07-01 06:42:57
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