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wnj007881

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 求助能使活细胞内碱性磷酸酶升高或降低的诱导剂或抑制剂

我现在做的一个荧光分子能与碱性磷酸酶结合,现在想人为调节活细胞内碱性磷酸酶含量的多少来测试荧光分子的响应,求助大家有什么诱导剂或抑制剂能改变细胞内碱性磷酸酶含量的。
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wnj007881

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-06-29 19:36:34
我们可以换个角度设计实验:改变注入细胞中的荧光分子的数量与浓度,这样来测定不同数量的比例的荧光分子与细胞内的目的酶分子之间的结合状况。

可以用同步化的同种类的细胞,然后分数量与浓度梯度注入同种的的荧 ...

非常感谢您的帮助!可能我的表述有些问题,我的荧光分子是作为酶的底物,在碱性磷酸酶的作用下分子结构发生变化,从而产生荧光增强。因此在我的实验里只要使碱性磷酸水解酶失活,就可以达到实验目的。

考虑到您上述的建议,我想是否可以找两种不同的细胞种类,他们细胞内的碱性磷酸酶含量差异很大。加入我的荧光分子后,做一组以时间为变量的荧光照片。碱性磷酸酶含量少的细胞荧光随时间基本没有变化,而碱性磷酸酶含量多的细胞荧光随时间变化逐渐增强。这样是否可以说明问题?
11楼2013-06-30 10:19:22
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wnj007881: 金币+5, 有帮助 2013-06-28 14:18:23
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-06-28 19:42:36
你直接在细胞外实验就可以达到同样目的,只要向荧光分子与碱性磷酸酶结合的反应体系不断分梯度加入荧光分子或碱性磷酸酶之一即可。
2楼2013-06-28 00:32:49
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wnj007881

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-06-28 00:32:49
你直接在细胞外实验就可以达到同样目的,只要向荧光分子与碱性磷酸酶结合的反应体系不断分梯度加入荧光分子或碱性磷酸酶之一即可。

细胞外实验我已经做过了,效果还不错。所以想试试活细胞内的响应,如果能实现,文章的档次肯定会升高。
3楼2013-06-28 14:19:49
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

这个我要查一些酶的抑制剂手册了。晚些时候答复。
4楼2013-06-28 15:22:48
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