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wnj007881

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 求助能使活细胞内碱性磷酸酶升高或降低的诱导剂或抑制剂

我现在做的一个荧光分子能与碱性磷酸酶结合,现在想人为调节活细胞内碱性磷酸酶含量的多少来测试荧光分子的响应,求助大家有什么诱导剂或抑制剂能改变细胞内碱性磷酸酶含量的。
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
wnj007881: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-06-30 10:04:15
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-06-30 16:19:27
1949stone: MolEPI+1, 神一样的存在 2013-07-01 07:51:35
我们可以换个角度设计实验:改变注入细胞中的荧光分子的数量与浓度,这样来测定不同数量的比例的荧光分子与细胞内的目的酶分子之间的结合状况。

可以用同步化的同种类的细胞,然后分数量与浓度梯度注入同种的的荧光分子,等适当时间后可以粉碎细胞,时间本身也可以分梯度划分,用分子筛分离分离出目的酶,用荧光光度计检测荧光强度,光谱法测定出酶的浓度,呈上体积获得目的酶的质量,然后与体外试验情况加以对比,这样可以获得一系列的原始数据。

用同步化的同种类的细胞也可以使用处于不同的细胞周期的细胞。

各种不同实验步骤的实验变量可以独立变化,总结果是相乘,可以收到的原始的实验数据会相当多。

不同的注入荧光分子的方法,不同的细胞类型,不同的荧光分子等等可以选择和调节的实验变量非常多。
10楼2013-06-29 19:36:34
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wnj007881: 金币+5, 有帮助 2013-06-28 14:18:23
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-06-28 19:42:36
你直接在细胞外实验就可以达到同样目的,只要向荧光分子与碱性磷酸酶结合的反应体系不断分梯度加入荧光分子或碱性磷酸酶之一即可。
2楼2013-06-28 00:32:49
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wnj007881

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-06-28 00:32:49
你直接在细胞外实验就可以达到同样目的,只要向荧光分子与碱性磷酸酶结合的反应体系不断分梯度加入荧光分子或碱性磷酸酶之一即可。

细胞外实验我已经做过了,效果还不错。所以想试试活细胞内的响应,如果能实现,文章的档次肯定会升高。
3楼2013-06-28 14:19:49
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

这个我要查一些酶的抑制剂手册了。晚些时候答复。
4楼2013-06-28 15:22:48
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