应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 关于植物合子胚的石蜡切片细胞破碎的问题，急求帮助！
51/1返回列表
查看: 2132  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

meredithwong

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于植物合子胚的石蜡切片细胞破碎的问题，急求帮助！

各位大神好，我做的是毛梾合子胚的石蜡切片，用来研究胚的发育。但是每次做出来细胞都是破碎的，看起来细胞是空的，只剩下一个细胞的框架了；而且我用番红-固绿染色后片子染不上红色，只有一片绿色。。。如图（图是手机照的，不清晰请见谅）
       我制作石蜡切片过程如下，取毛梾合子胚，FAA（50%酒精）固定液固定24h，逐级脱水：15%，30%，50%，70%，83%，95%，100%，100%，每级20min，纯酒精每级10min；透明：1/2二甲苯+1/2酒精15min，二甲苯5min，二甲苯5min；浸蜡：加3次碎蜡38℃温箱45min，换纯蜡45℃ 30min，再换纯蜡58℃ 30min，然后包埋；切片厚度是8μm；然后番红-固绿染色。我以前也尝试过脱水1h，透明30min，浸蜡3d左右，可是不管用哪种程序做细胞都是破碎的，急死我了！！！请各位大神提点，到底是哪一步程序出了问题。谢谢啦！！
        需要说明的是这个合子胚很小（一半芝麻那么大），含水量很高，一碰就会破碎，不知这个会不会对切片的过程造成影响？要怎么调整？谢谢各位大神！！
关于植物合子胚的石蜡切片细胞破碎的问题，急求帮助！
IMG_20130326_114845.jpg
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

实用技术

» 猜你喜欢
重口味屌丝爱科学
1楼 2013-06-22 21:20:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

meredithwong

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wudiliusha at 2013-06-23 11:54:43
我不明白你明明是用50%的酒精固定后，还要用<50%的酒精进行脱水。你这明摆着要细胞涨裂么？我一般都是使用大于固定也浓度进行脱水。

一般对于组织比较嫩的，你固定液浓度可以小一点。

看你这操作也应该是在 ...

好的，谢谢你。固定液酒精浓度可以低到30%吗？
赞一下 回复此楼
重口味屌丝爱科学
5楼2013-06-28 22:36:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

wudiliusha

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我不明白你明明是用50%的酒精固定后，还要用<50%的酒精进行脱水。你这明摆着要细胞涨裂么？我一般都是使用大于固定也浓度进行脱水。

一般对于组织比较嫩的，你固定液浓度可以小一点。

看你这操作也应该是在脱水的过程中有问题，后面切一般不会造成这种结果。
赞一下(1人) 回复此楼
认真生活，快乐工作。
2楼2013-06-23 11:54:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你脱水时间是不是太短了。首先应该拿70%的酒精脱吧。至少也得一个小时吧。浸蜡的时间也太短了，最好升高点温度加长点时间。
赞一下 回复此楼
3楼2013-06-24 11:39:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lion1998

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
lz用的FAA固定液是甲醛+乙酸+水吧？如果是的话应该没有什么问题。对于含水量高的材料，除了脱水过程要延长一些（我们一般能增加到30min/次），前面固定的时候，要真空抽气的。另外，不知道是楼主没有写清还是怎样，从二甲苯到石蜡这一步，也是需要比例梯度的，3:1,1:1,1:3，直到纯石蜡，每步我都是浸≥4小时的。
lz不要灰心，胚的大小没有影响，我做的材料种子只有三分之一芝麻大小，胚一样可以切出来的，实在不行你就换环氧树脂切，毕竟锇酸戊二醛固定，丙酮脱水效果更好
赞一下(1人) 回复此楼
Iamaleafonthewind.
4楼2013-06-24 16:07:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +4 349506619 2026-08-28 4/200 2026-08-29 22:41 by alongwaytogo
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-29 22:27 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 国社科申报系统有变化 +3 kynobel 2026-08-23 3/150 2026-08-29 21:57 by 余韵清
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-29 21:44 by 4qO8zhfjr2AX
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-29 21:33 by 4qO8zhfjr2AX
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-29 21:22 by 4qO8zhfjr2AX
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-29 17:31 by 4FFAWE8HcgUD
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 17:30 by 4FFAWE8HcgUD
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-29 17:22 by 4FFAWE8HcgUD
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +5 gdd2018 2026-08-28 10/500 2026-08-29 14:10 by Jacob678
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-29 14:03 by jCd0dEvKHShX
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 4/200 2026-08-29 13:51 by jCd0dEvKHShX
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 11:49 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭