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小科研女dow

木虫 (小有名气)

[求助] 蛋白表达不出来,是什么原因造成的已有1人参与

各位虫友,我之前一直在做基因文库,好不容易从文库中筛到了具有我要的酶活性的克隆子。但是通过测序,是一条具有好几个阅读框的基因片段,但是发现并没有相似甚至相关的酶的基因,都是一些膜蛋白组件,还有几个是没有报道的未知蛋白,可是通过活性检测,明明是有活性的。
我的做法就是,将测序结果分析阅读框,挑了几个较大的阅读框(2000bp-500bp)都分别设计引物克隆表达,但是都做了4个了,都没有表达出蛋白,是一点都没有啊。
请问这是怎么回事?是不是不是所有的完整阅读框都能表达蛋白,只是有功能性的蛋白可以表达?
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yanlinchun

铜虫 (小有名气)

还是在用毕赤酵母表达吗?
6楼2013-08-10 16:49:47
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