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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 色谱峰前沿与拖尾
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飞燕-五星岩

金虫 (小有名气)

[求助] 色谱峰前沿与拖尾

想问各 位大师，用氨水调流动相的PH与用三乙胺调流动相的PH有啥区别吗？本人现在用的流动相用氨水调PH,由于柱子有点前沿且拖尾，请问我可不可以用三乙胺代替氨水调PH啊？急急急
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我努力我成功
1楼2013-06-18 15:38:07
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主，不同的缓冲液都有自己相应的pKa值，你用该缓冲液来调pH值的时候，也要考虑到它的pKa值是否落在你的待测物的正负2之间，只有那样才能确保你的待测物不被解离。至于你说峰型不好，可能就是pH值调的范围有点问题，你可以微调试一试。
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2楼2013-06-21 09:26:40
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飞燕-五星岩

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by raulsam1984 at 2013-06-21 09:26:40
楼主，不同的缓冲液都有自己相应的pKa值，你用该缓冲液来调pH值的时候，也要考虑到它的pKa值是否落在你的待测物的正负2之间，只有那样才能确保你的待测物不被解离。至于你说峰型不好，可能就是pH值调的范围有点问题 ...

谢谢大师，，不过我还想说一下，我那缓冲盐里有离子对试剂——四丁基氢氧化铵，它对柱子伤害比较大，且我的缓冲盐的PH 要求9.5.我用新柱子刚开始峰都挺好，用几天后峰形就不好看了，前沿加拖尾，请问有啥办法可是我的色谱柱使用期延长一下？
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我努力我成功
3楼2013-06-22 10:28:28
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yan1984

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

换耐碱性的色谱柱。
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4楼2013-06-22 23:09:33
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yugijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

应该是你的色谱柱出问题了，建议用agilent的extend试试
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5楼2013-06-24 09:33:33
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 飞燕-五星岩 at 2013-06-22 10:28:28
谢谢大师，，不过我还想说一下，我那缓冲盐里有离子对试剂——四丁基氢氧化铵，它对柱子伤害比较大，且我的缓冲盐的PH 要求9.5.我用新柱子刚开始峰都挺好，用几天后峰形就不好看了，前沿加拖尾，请问有啥办法可是我 ...

楼主，你缓冲盐的pH值范围可能超过你的色谱柱的耐受范围了，色谱柱可能有损坏了，因为一般的c18柱pH范围是2-8，导致峰型变差的原因可能是这个。你最好买一根耐受范围广一点的柱子。菲罗门跟waters都有这类柱子卖。
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6楼2013-06-24 09:45:25
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飞燕-五星岩

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by raulsam1984 at 2013-06-24 09:45:25
楼主，你缓冲盐的pH值范围可能超过你的色谱柱的耐受范围了，色谱柱可能有损坏了，因为一般的c18柱pH范围是2-8，导致峰型变差的原因可能是这个。你最好买一根耐受范围广一点的柱子。菲罗门跟waters都有这类柱子卖。...

谢谢楼主，我用的thermo色谱柱，ODS-2，它适合的PH为1-10，做小浓度的（几ug）还行，大浓度供试品（1mg/ml）第一针还行，第二针就不行了，我方法学还没有做完呢，现在换别的厂家的别的型号的柱子，行不啊？
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我努力我成功
7楼2013-06-24 10:35:59
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raulsam1984

木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 飞燕-五星岩 at 2013-06-24 10:35:59
谢谢楼主，我用的thermo色谱柱，ODS-2，它适合的PH为1-10，做小浓度的（几ug）还行，大浓度供试品（1mg/ml）第一针还行，第二针就不行了，我方法学还没有做完呢，现在换别的厂家的别的型号的柱子，行不啊？...

大浓度的，估计是浓度太大，色谱柱过载了。换别的柱子可以，就是要做一个耐用性的实验，看两根柱子上测的含量RSD值是否小于2%。
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8楼2013-06-24 10:46:55
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飞燕-五星岩

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by raulsam1984 at 2013-06-24 10:46:55
大浓度的，估计是浓度太大，色谱柱过载了。换别的柱子可以，就是要做一个耐用性的实验，看两根柱子上测的含量RSD值是否小于2%。...

好的，谢谢楼主！
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9楼2013-06-24 13:45:59
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