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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » AFLP——聚丙烯酰胺凝胶电泳
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lingling1988

铜虫 (初入文坛)
★
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-07-27 21:57:12
引用回帖:
10楼: Originally posted by shucanwei at 2013-06-20 00:32:54
想传一张预扩增的图片给你看看，但是上传不了啊

我也是用2%琼脂糖跑的，只是上样有点少，3.5ul。连接产物稀释10倍，加2.5ul做的预扩增。那么弥散这么大可能什么原因呀，难道是酶切的时候切过了？
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11楼2013-06-20 19:24:10
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lingling1988

铜虫 (初入文坛)
★ ★
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-07-27 21:56:21
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-07-27 21:57:19
引用回帖:
10楼: Originally posted by shucanwei at 2013-06-20 00:32:54
想传一张预扩增的图片给你看看，但是上传不了啊

这个就是我用人家试剂盒里预扩产物稀释40倍后做选扩跑出来的图。这么一看，我的模板跑出来的图真的是差太远了，哎，看来还得看看DNA质量和双酶切体系了。但是双酶切产物跑出那个样子会是什么原因呢？
AFLP——聚丙烯酰胺凝胶电泳
1.jpg
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12楼2013-06-21 17:03:54
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shucanwei

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-07-27 21:57:26
是的，那就找出原因来了，重新提取DNA吧。
我做过酶切过夜都没有问题啊。
而且酶切后都不用电泳的。
我是300ngDNA进行酶切，体系是20ul，如果酶切后再跑电泳，根本就看不清啊。
还有你的接头是新制备的吗？这个也要注意一下。
祝你好运。
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唯以一人治天下，不以天下奉一人。
13楼2013-06-22 08:20:50
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lingling1988

铜虫 (初入文坛)
★
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-07-27 21:57:32
接头是试剂盒里的。那我再用新提取的DNA试一下吧，谢谢啦~
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14楼2013-06-22 08:50:35
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lingling1988

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by shucanwei at 2013-06-20 00:32:54
想传一张预扩增的图片给你看看，但是上传不了啊

嘿嘿，你好，又来打扰了。请问，做AFLP的时候，如果引物浓度低的话会造成多态性降低的情况吗？
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15楼2013-07-26 11:49:48
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shucanwei

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-07-27 21:57:38
引用回帖:
15楼: Originally posted by lingling1988 at 2013-07-26 11:49:48
嘿嘿，你好，又来打扰了。请问，做AFLP的时候，如果引物浓度低的话会造成多态性降低的情况吗？...

你好，我曾做了条件优化，是会有影响的，但是不大

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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唯以一人治天下，不以天下奉一人。
16楼2013-07-27 10:15:35
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lingling1988

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
16楼: Originally posted by shucanwei at 2013-07-27 10:15:35
你好，我曾做了条件优化，是会有影响的，但是不大
...

好的，谢谢
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lingling1988 lingling1988
17楼2013-07-28 09:53:56
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lingling1988

铜虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
17楼: Originally posted by lingling1988 at 2013-07-28 09:53:56
好的，谢谢...

疑问又来了，我对扩增位点和多态性位点这两个概念一直很模糊，能不能帮我解答一下
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18楼2013-07-30 20:33:09
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lingling1988

铜虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
17楼: Originally posted by lingling1988 at 2013-07-28 09:53:56
好的，谢谢...

还有一个问题，要怎么做重复，就是要做几次重复才能确定引物对的多态性条带？
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19楼2013-07-31 08:09:52
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樱落夕

铁虫 (初入文坛)
你好，能不能给我发一下你的胶的配方？谢谢
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20楼2014-12-02 17:43:26
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