| 查看: 1386 | 回复: 11 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者werty1245将赠送您 3 个金币 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
总是提不出来细菌基因组DNA已有1人参与
|
||
|
最近一直手提屎肠球菌的基因组DNA，开始用的是6μl 50mg/ml溶菌酶，37℃3h；10%SDS和蛋白酶K，55℃2h；5M NaCl；酚氯仿异戊醇抽提两次；2倍体积无水乙醇洗脱；75%酒精洗涤，离心，烘干。一直提不出来，后来又用CTAB/NaCl法，也没提出来，谁提出来过，教教我~~~ 小妹不胜感激~~~ |
回复此楼» 猜你喜欢
二苄基磷酰氯，磷酸接酚羟基，
已经有11人回复
-
二苄基磷酰氯，磷酰氯
已经有10人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有261人回复
-
酸酐或者羧酸酰氯化
已经有15人回复
-
酚羟基接入磷酸，磷酸酯化
已经有26人回复
-
土壤中可溶性有机碳种类
已经有1人回复
-
韩国海关检测食用植物油中的苯并芘用的是哪种方法？
已经有0人回复
-
现有pP43NMK质粒，想换了pHT43，或者其他芽孢杆菌过表达质粒
已经有5人回复
-
请教脂质体包裹miRNA
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 提取细菌基因组DNA
已经有9人回复
- 基因组DNA提取结果
已经有17人回复
- 求助！关于革兰氏阳性菌DNA提取的问题
已经有31人回复
- 用试剂盒提细菌基因组 有个菌提不出来~~求解
已经有5人回复
- 细菌基因组文库构建的相关问题
已经有23人回复
- 细菌基因组的部分酶切
已经有16人回复
- 手提基因组方法遇到的问题
已经有12人回复
- 细菌基因组DNA提取 交流
已经有18人回复
- 细菌全基因组提取时需要加入RNA酶吗？
已经有15人回复
- 提的纯菌DNA的琼脂糖凝胶电泳怎么跑成这个样子?
已经有25人回复
- EcoRI 酶切细菌基因组切不开
已经有19人回复
- PCR植物基因组DNA，为什么就一直P不出来捏
已经有34人回复
- 环状基因组的PCR
已经有4人回复
- 酿酒酵母基因组PCR出了16S的条带
已经有8人回复
- 基因组提取过程中加入溶菌酶有白色沉淀
已经有13人回复
- 放线菌基因组DNA提取后，用TE不溶！！？
已经有20人回复
- 提基因组DNA电泳有三条带是怎么回事啊?
已经有6人回复
- 基因组提取
已经有7人回复
- 【求助/交流】提细菌DNA的同时有没有可能把动物组织DNA提出来呢
已经有10人回复
- 【求助/交流】提取DNA总提不出来
已经有23人回复
- 【求助/交流】细菌基因组DNA的提取法（CTAB/NaCl 法）,提取的DNA是否为细菌总DNA? 非�
已经有11人回复
夏天的普洱茶
木虫 (著名写手)
- 应助: 69 (初中生)
- 金币: 5112.5
- 红花: 18
- 帖子: 1048
- 在线: 439.9小时
- 虫号: 1427657
- 注册: 2011-10-05
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2013-06-09 12:16:38
夏天的普洱茶
木虫 (著名写手)
- 应助: 69 (初中生)
- 金币: 5112.5
- 红花: 18
- 帖子: 1048
- 在线: 439.9小时
- 虫号: 1427657
- 注册: 2011-10-05
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2013-06-09 10:35:35
3楼2013-06-09 11:09:12
lmcyjxs
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 1088.2
- 散金: 119
- 红花: 7
- 帖子: 954
- 在线: 124.3小时
- 虫号: 1255578
- 注册: 2011-04-05
- 性别: MM
- 专业: 中药资源
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-06-09 21:53:14
gyesang: 回帖置顶 2013-06-10 16:56:31
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-06-09 21:53:14
gyesang: 回帖置顶 2013-06-10 16:56:31
|
保证提取过程中每一步准备到位。我没提过细菌的，提的都是木本的组织，用的是异硫氰酸胍法，细菌理论上是比较好提的， 1 注意用量要足够 2 注意试剂及试剂配制没有问题 3 注意操作要细心，细菌蛋白含量应该比较多吧，可以结合氯仿多抽几次，提一点，酚氯仿是自己配的吗？注意要用Tris饱和酚 4 可以买个试剂盒试试。 5 提完不要只跑电泳，要去测纯度和浓度去发现问题，比如是否蛋白含量过高，杂质过多影响电泳观察，这完全是可能的，还有是否因为染料过期问题影响观察等等。 每一步都要注意，多总结，多观察。 |
5楼2013-06-09 12:17:01
5