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HepG2细胞复苏不成功,求解!
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给位大侠帮帮我吧!我2013年4月8日冻存的HepG2细胞6月8日去复苏,没有复苏成功。我冻存时冻存液的比例是DMEM:胎牛血清 MSO=7:2:1,冻存过程是:消化-离心-冻存液重悬-移至冻存管中,4度30分钟,-20度近两个小时,然后一直放在-70度中。复苏时快速放置40度水浴锅中2分钟内溶解,没有离心直接加培基5ML,结果晚上看还没有贴壁,后来一直没有贴壁。我以为是我冻存时操作问题或是我没有离心的原因等。我要我同学拿她的HepG2细胞复苏。他的细胞大概在3月份冻的,冻存的操作和冻存液我们的是一样的。复苏时她离心了,500rpf, 5 min。其余操作一样。结果还是没有复苏成功。 但是我还有一个同学,虽然跟我养的不是一样的细胞,但是所有的冻存液和冻存方法一致,但是她的就复苏成功了。 这到底是什么原因呀?望各位大侠帮我分析分析吧 |
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7楼2013-06-13 14:48:52
2楼2013-06-09 10:14:07
3楼2013-06-09 10:18:31
zx1984
木虫 (正式写手)
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4楼2013-06-09 13:48:58













MSO=7:2:1,冻存过程是:消化-离心-冻存液重悬-移至冻存管中,4度30分钟,-20度近两个小时,然后一直放在-70度中。复苏时快速放置40度水浴锅中2分钟内溶解,没有离心直接加培基5ML,结果晚上看还没有贴壁,后来一直没有贴壁。
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