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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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daohaode4188

金虫 (小有名气)

[求助] 帮忙分析下PCR的条带

所有的实验条件都是一样的,除了操作的人不一样,目的基因是1500bp,除了9号其它基本上都出来了。。
用的DNA的大小是23130,9号的位置差不多也是23130bp。。大神们帮忙分析下原因。。
帮忙分析下PCR的条带
PCR副本jiaoyang324234.jpg
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
daohaode4188: 金币+2, ★★★很有帮助, 样品的浓度确实不一样,这可能是出错的原因。。不过具体的机制还是不太明白。。为什么模板浓度高的话,就会非特异性扩增? 2013-06-09 09:31:19
9号里23K的带应该就是你用的模板了。如果PCR产物跑成这样,说明模板用量太高,造成PCR失败。4号也有这条大带,但是没有9号多,所以勉强P出目的条带了。你把9号样品稀释一再P。
7楼2013-06-09 00:33:07
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wencheng1109

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
daohaode4188(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-06-09 09:18:57
你的4号不是也出了与9号相同大小的条带了么,我觉得做个梯度,我以前也遇到这样的情况。做了梯度后有结果了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2013-06-08 22:13:10
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daohaode4188

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wencheng1109 at 2013-06-08 22:13:10
你的4号不是也出了与9号相同大小的条带了么,我觉得做个梯度,我以前也遇到这样的情况。做了梯度后有结果了

额。。学校的课内试验。。问老师也不知道。。。所以问问。。能大概分析分析嘛~~
4楼2013-06-08 23:01:56
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daohaode4188

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhoulubin at 2013-06-08 21:26:59
加样误差

额,还不是太懂。。
提取的DNA是一样的,用的引物也是一样的,扩增出来的应该是目的基因才对,但是9号扩增出来的,跟原DNA模板的长度一样。。
5楼2013-06-08 23:06:27
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