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15895241331

铁虫 (正式写手)

[求助] 小分子蛋白的western blotting注意事项

本人要跑11到17kD的蛋白质,做了两次无结果,分离胶15%,电泳100V 1.5h,转膜350mA 45min, 封闭1h。求高搜指点一二!
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songzuowei

木虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 15895241331 at 2013-06-07 14:28:38
谢谢...

7楼2013-06-07 15:06:11
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kx444555

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
15895241331(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-06-07 08:52:17
建议做梯度胶跑SDS-PAGE,比如4%-20%
星陈代谢
2楼2013-06-06 15:18:01
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songzuowei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
15895241331(myprayer代发): 金币+1, Send person rose fragrance in hand, thank you loosen one's purse strings generously, look forward to your wonderful 2013-06-07 08:52:29
我认为一你的封闭时间太短,37°至少两小时,二 转膜时间太长,这么小的蛋白,半干转15min就足够了

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2013-06-06 16:39:57
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15895241331

铁虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by songzuowei at 2013-06-06 16:39:57
我认为一你的封闭时间太短,37°至少两小时,二 转膜时间太长,这么小的蛋白,半干转15min就足够了

我们做的是组蛋白,在提取蛋白样品的时候有木有什么特别的注意事项?,这个小蛋白需要封闭这么长时间吗?我们转膜用的是湿转
4楼2013-06-07 12:14:04
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