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天叶之羽

新虫 (初入文坛)

[求助] 酶的硫酸铵沉淀

我做的酶的纯化,打算首先采用硫酸铵沉淀法从发酵液中得到粗酶,但是硫酸铵浓度到90%,冰箱内过夜后,再8000g离心半小时后,目的酶基本还是在溶液里,没有沉淀出来!我看文献里基本到80%就沉淀出来了。
    现在我有两个疑问:1、是不是因为发酵液中蛋白含量太低(约0.1mg/mL),导致的目的酶在高硫酸氨浓度仍沉淀不出?怎样可以有效地酶没沉淀下来呢?
    2、超滤对酶活有很多损失吗?

希望能在这收集到大家的建议,帮助我实验顺利进行。
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【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2013-06-06 07:43:57
天叶之羽(wizardfan代发): 金币+1, 谢谢参与 2013-06-11 06:43:46
同一种酶的性质也是有不同的,别人的实验结果怎么说也是别人的,不一定自己的就也那样,以自己的实验结果为准。

超滤一般不会使酶活力有损失。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2013-06-06 03:23:17
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