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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » DNA引物问题
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心碎

新虫 (小有名气)

[求助] DNA引物问题

朋友们，本人是做化学的，对生物不太了解，想请教一下买来的DNA引物，其中的磷是以磷酸基团存在的吗？还是有其他的修饰，对引物不是很了解！谢谢了！
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实验顺利，其他都是浮云
1楼 2013-06-04 11:39:16
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
心碎(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-06-04 18:11:04
心碎: 金币+4, ★★★很有帮助 2013-08-27 15:13:10
一般的引物里面所有的磷是以--PO2--的形势存在的, 没有PO3-, 但是, 你可以在定引物的时候要求公司做磷酸化, 这样引物的末端(3')就会有一个PO3-了
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2楼2013-06-04 15:42:59
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王者归来001

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你所有的DNA引物的作用如何，为何关注在P的存在形式？
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坚持不懈,终会成功!
3楼2013-06-04 23:00:57
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taojun

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-05 11:59:40
你干嘛要关注磷呢，你只要关注你的引物是否是环状，上下游引物配对情况啊！
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4楼2013-06-05 01:32:21
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心碎

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-06-04 15:42:59
一般的引物里面所有的磷是以--PO2--的形势存在的, 没有PO3-, 但是, 你可以在定引物的时候要求公司做磷酸化, 这样引物的末端(3')就会有一个PO3-了

哦，这个实验中磷的存在形式很关键，一直没成功过，所以放了一段时间了，现在知道了，谢谢！
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实验顺利，其他都是浮云
5楼2013-08-27 15:14:35
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心碎

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by taojun at 2013-06-05 01:32:21
你干嘛要关注磷呢，你只要关注你的引物是否是环状，上下游引物配对情况啊！

因为我的反应就是要用磷酸的形成才可以发生
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实验顺利，其他都是浮云
6楼2013-08-27 15:16:50
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心碎

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 王者归来001 at 2013-06-04 23:00:57
你所有的DNA引物的作用如何，为何关注在P的存在形式？

我的反应是要用磷酸形式才可以进行的，但是当时只是说引物合成，拿回来后，怎么都无法反应上。
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实验顺利，其他都是浮云
7楼2013-08-27 15:18:08
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心碎

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-06-04 15:42:59
一般的引物里面所有的磷是以--PO2--的形势存在的, 没有PO3-, 但是, 你可以在定引物的时候要求公司做磷酸化, 这样引物的末端(3')就会有一个PO3-了

如果，我说要磷酸化的话，所有的磷都会以酸的形式存在还是只有3'端是磷酸形式呢？
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实验顺利，其他都是浮云
8楼2013-08-27 15:21:14
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bullfrog325

木虫 (正式写手)
只有3'的那个可以, 其他的磷左右各要连接一个碱基, 不能以PO3的方式存在.
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心碎
9楼2013-08-27 18:28:00
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心碎

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-08-27 18:28:00
只有3'的那个可以, 其他的磷左右各要连接一个碱基, 不能以PO3的方式存在.

我懂你的意思了，非常感谢！
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实验顺利，其他都是浮云
10楼2013-08-28 09:44:57
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