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fangyuanpan银虫 (小有名气)
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土壤里面分出两株菌按细菌的16s扩不出来,按真菌的18s还是扩不出来,快哭了 已有1人参与
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| 土壤里面分出两株菌(本来是分离放线菌的但是现在不知道这个是什么菌)按细菌的16s扩不出来,按真菌的18s还是扩不出来,快哭了,P过多次了,不是试剂有问题,因为分出的有一个可以扩出来的。大家给出处主意啊吗,难道除了细菌真菌还有别的? |
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土壤微生物16s rDNA 18s rDNA 抑制扩增不出来??????
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fangyuanpan
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WSW_Alone
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【答案】应助回帖
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1. 你用的什么培养基?你从形态上初步判断是什么类型的菌?细菌?放线菌?还是真菌? 2. 你这两株菌提取的DNA测过浓度没有?或者跑电泳看了下提出来没有?还是直接拿菌液或菌落扩增的? 3. 如果确定提出了DNA,那么有可能是因为该菌G+C较高所以比较难扩增。 4. 你可以尝试添加海藻糖http://muchong.com/html/201004/1872619.html这个帖子中就提到了:海藻糖能很好的促进高GC含量片段的扩增。(你可以看看这个帖子,尝试添加一定浓度的海藻糖到PCR体系中) |

2楼2013-06-03 21:57:47
3楼2013-06-04 04:26:49
fangyuanpan
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