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静静秋木虫 (正式写手)
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Tricine胶应该怎么跑？已有4人参与
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最经在做小分子蛋白，试过了17%和Tricine胶，Tricine胶的效果更好，楼主果断决定做Tricine胶，用的是Nature protein上面的配方，用的是两层胶，没有加尿素。电压选用的是30V跑40-50min后改用130V跑至底部，放在4℃环境中电泳时间约为3h，用的是bio-rad的mini型的电泳槽。然后固定染色脱色，出现以下问题： 1.买的是低分子多肽作为Marker，有5个条带，最下面的两个条带有点拖尾且不清晰，有点弥散的现象，感觉上是没有怎么分开，最重要的，分子量根本对不上。 2.Marker总是会拖着临近的样品条带，临近Marker的条带总是跑的很丑很丑。 3.8.8KDa以下的样品条带不清楚，当然这个有可能是样品的问题，但是小分子确实没有被分开的感觉，不清楚。 楼主下一步的想法是确认Marker应该怎么跑的问题，接着再确认超小分子跑不开的问题，请牛人帮忙解决一下，需要在胶里面加尿素吗？跑胶的电压是不是太高了呢?bio-rad电泳槽是不是只能跑普通胶不能做小分子胶呢？ |
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10楼2014-10-09 14:43:54