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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » western blotting 结果像考马斯亮蓝染色
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thaw

铜虫 (小有名气)

[求助] western blotting 结果像考马斯亮蓝染色

几次了结果都是这样，条带很多像考染的结果，请大师指教。
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1楼 2013-05-28 23:56:52
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-29 08:34:40
thaw: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-05-30 22:12:46
有可能是抗体的特异性不好或者纯度差。是自己做的抗体吗？现在的多抗多数需要纯化一下才好用的。
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2楼2013-05-29 07:18:30
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
thaw: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-05-30 22:12:59
引用回帖:
3楼: Originally posted by thaw at 2013-05-29 23:04:51
罗氏的标签抗体，抗体应该是没问题的。谢谢...

你要的信号强弱如何？可能是抗体稀释比例不对。
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4楼2013-05-30 05:49:53
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84146922

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
抗体效果不好....建议考虑抗体特异性，或者优化抗体稀释倍数
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8楼2013-05-31 21:08:01
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普通回帖

thaw

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-29 07:18:30
有可能是抗体的特异性不好或者纯度差。是自己做的抗体吗？现在的多抗多数需要纯化一下才好用的。

罗氏的标签抗体，抗体应该是没问题的。谢谢
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3楼2013-05-29 23:04:51
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thaw

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-30 05:49:53
你要的信号强弱如何？可能是抗体稀释比例不对。...

哦我再试一下，非常感谢
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5楼2013-05-30 22:12:15
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mitocam

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
thaw: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-06-01 11:13:50
thaw: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-06-01 11:16:34
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-06-01 15:03:23
洗液有没有加TWEEN或者奶粉溶液是否新鲜，有时抗体非特异性沉淀在膜上和蛋白质带上造成上述结果。
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6楼2013-05-31 02:37:35
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linxt2005

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
thaw: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-06-01 11:16:28
封闭 有没有问题。
使用的奶粉或者ＢＳＡ是否新鲜，浓度如何。
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小兵一个
7楼2013-05-31 11:11:13
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thaw

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by mitocam at 2013-05-31 02:37:35
洗液有没有加TWEEN或者奶粉溶液是否新鲜，有时抗体非特异性沉淀在膜上和蛋白质带上造成上述结果。

都是现配的，非常感谢！
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9楼2013-06-01 11:15:26
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thaw

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by linxt2005 at 2013-05-31 11:11:13
封闭 有没有问题。
使用的奶粉或者ＢＳＡ是否新鲜，浓度如何。

封闭应该没有问题，用的新配的奶粉，5%
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10楼2013-06-01 11:16:15
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