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kabuqinuo89

新虫 (小有名气)

[求助] DNA片段连接到载体上都有什么方法

将目的片段连接到载体上,除了双酶切还有什么别的方法没
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peng~yu

银虫 (小有名气)

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kabuqinuo89(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-28 10:35:08
我们实验室一般都是用双酶切的方法去连~感觉问题不大~这种方法也是挺成熟的一套方法~或者你可以参考转基因作物的研发历史~不过我觉得这样有点大材小用~
2楼2013-05-28 09:56:59
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stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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kabuqinuo89(myprayer代发): 金币+1, 感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-28 10:35:21
kabuqinuo89: 金币+2 2013-05-28 15:36:27
overlap PCT and inverse-overlap PCR(http://www.biotechniques.com/mul ... _Materi_96566a.pdf)
3楼2013-05-28 10:03:57
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whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
酶切连接是目前比较主流的方法
4楼2013-05-28 12:48:59
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kabuqinuo89

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by stevenshi021 at 2013-05-28 10:03:57
overlap PCT and inverse-overlap PCR(http://www.biotechniques.com/multimedia/archive/00096/Supplementary_Materi_96566a.pdf)

那个连接好像损坏了 你能给我再发一下吗
5楼2013-05-28 15:36:15
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stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

Biotechniques. 2010 Jun;48(6):463-5. doi: 10.2144/000113418.
Overlap extension PCR cloning: a simple and reliable way to create recombinant plasmids.
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20569222
6楼2013-05-29 09:14:28
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

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kabuqinuo89: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-05-30 09:11:27
现在有很多新的克隆方法,就说名称吧,具体内容,你可以自己去查:
TA cloning
LIC and SLIC
CEPC
gateway
infusion
PIPE
gibson
........
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
7楼2013-05-29 18:54:44
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