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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光定量PCR进行二重检测怎样处理FAM 和VIC信号相互干扰的问题？（ABI StepOne Plus）
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树枝儿

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量PCR进行二重检测怎样处理FAM 和VIC信号相互干扰的问题？（ABI StepOne Plus）

各位大虾：
       本人在做医疗诊断的应急项目，其中涉及到荧光定量双通道的二重检测，于是我选定了大部分人选 用的搭配 FAM 和VIC通道，其中与FAM 对应的淬灭基因为BHQ， 与VIC通道对应的淬灭基因为TAMRA。在检测的过程中总是出现FAM通道的信号漏到VIC通道，有时也能反过来，刚开始以为是模板的污染或者是仪器校正的问题，结果一一排除了，后来有人说是仪器本身的物理因素造成的，FAM和VIC荧光波长本来就有重叠的部分，这也是事实，可是这样会造成结果的判读有问题，各位做荧光的大虾给我指点指点迷津：或是规范结果判断的方法或是减少荧光干扰。多谢了啦！
为了方便大家了解情况，我将干扰情况截图如下：
荧光定量PCR进行二重检测怎样处理FAM 和VIC信号相互干扰的问题？（ABI StepOne Plus）
双重检测扩增曲线.jpg
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1楼 2013-05-27 17:27:22
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yuyixst

木虫 (正式写手)
★
myprayer: 金币+1, Send person rose fragrance in hand, thank you loosen one\'s purse strings generously, look forward to your wonderful 2013-05-30 10:08:54
没办法了，把VIC换成ROX或者CY5就好了
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2楼2013-05-27 19:54:00
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树枝儿

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yuyixst at 2013-05-27 19:54:00
没办法了，把VIC换成ROX或者CY5就好了

ROX已作为我们参考荧光了！至于CY5不常用，我考虑一下
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3楼2013-05-28 09:03:06
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hudiefeizhu

新虫 (初入文坛)
我们公司用的全都是BHQ FAM, HEX，没有这样的情况
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4楼2014-05-04 12:01:28
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