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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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残刀无痕

新虫 (初入文坛)

[交流] 研一小硕 构载体吐血求助 已有6人参与

由于本人是农学背景,基本没学分子生物学等课程,不懂的东西太多了,实验一直不太顺,载体构了将近一学期了都没弄出来,还被老板批过!
本人要构两个载体,先从拟南芥基因组中用普通Taq酶扩了两个启动子(后面才知道要用高保真酶啊)。A启动子连上后送去测序,发现有两个碱基突变,不知道能不能用?[/i]B启动子一直连不上,感觉比例、酶切微点什么的没问题啊!不知什么原因?
   现在要不要用Phusion酶从拟南芥中再次扩这两启动子以保证序列完全对呢?[/i]
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xfliu

银虫 (小有名气)


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3楼: Originally posted by 残刀无痕 at 2013-05-22 17:16:17
不是,是2300表达载体!...

按4楼说的,先TA克隆,再酶切连接2300
5楼2013-05-23 11:00:55
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xfliu

银虫 (小有名气)

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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-22 20:48:41
是TA克隆连接不上吗?
2楼2013-05-22 17:06:26
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残刀无痕

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xfliu at 2013-05-22 17:06:26
是TA克隆连接不上吗?

不是,是2300表达载体!
3楼2013-05-22 17:16:17
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Renavatio

木虫 (小有名气)

★ ★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-22 20:48:50
可以先连T载体,测序后酶切,连接到表达载体
Undefined!
4楼2013-05-22 20:25:52
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