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DNA电泳图分析求助
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776142
金虫
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虫号: 774110
[交流]
DNA电泳图分析求助
跑了很多次从DH5a大肠杆菌中用合成的萃取材料分离出的DNA电泳,总是出现问题,操作是按照碱法裂解的方法配制溶液1,2,3同时在1中加入RNA酶,然后用合成的材料吸附洗脱,但在200处左右总出现很亮的条带,加大RNA酶的浓度也无法解决,并且跑出的DNA条带与试剂盒得到的最亮条带也不在一条直线上,不知道是不是我用1M的NaCl洗脱后的结果,希望明白的朋友们能够帮忙解决下,不尽感激。
图片3.jpg
[
Last edited by 776142 on 2013-5-21 at 10:02
]
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2013-05-21 10:00:50
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776142
金虫
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12楼
:
Originally posted by
jinluzhang
at 2013-05-21 15:30:39
你试过测一下DNA的260/280吗?我觉得你这个后面100左右那儿的亮带像蛋白,而且你这个图歪歪扭扭的琼脂糖没有充分融好,多煮一会儿。再有你试剂盒提出来怎么有杂带呢?你的样品最好用同一批次培养的大肠杆菌。
OD值都2.1了 实在不知道怎么回事了
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13楼
2013-05-21 19:25:15
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youngker918
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776142(金币+1): 谢谢参与
776142(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。
2013-05-21 13:18:57
有可能啊,建议你氯化钠洗脱后再做下脱盐
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3楼
2013-05-21 10:49:53
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木虫
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★ ★
776142(金币+1): 谢谢参与
776142(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流经验!
2013-05-22 00:59:58
我以前做的时候也是这样,我一开始也是RNA酶加的量很大,后来我一般是大提,然后做一次回收,效果还行
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6楼
2013-05-21 14:04:21
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776142
金虫
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3楼
:
Originally posted by
youngker918
at 2013-05-21 10:49:53
有可能啊,建议你氯化钠洗脱后再做下脱盐
能告诉下具体的除盐过程吗,刚接触这一领域不太懂,谢谢。我是用300微升的1M氯化钠洗脱的,
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7楼
2013-05-21 14:17:39
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