24小时热门版块排行榜    

查看: 2317  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

蓝慧

木虫 (正式写手)

[求助] 荧光定量扩增效率低

如题,在做荧光定量标曲的时候,目的基因的扩增效率很低,但是方程线性很好。用的是天根的fp204定量试剂盒,20微升体系(Mix 10ul, forward primer 0.6ul, reverse primer 0.6ul, DNA 2ul, 50X ROX 0.2ul, ddH2O 6.6ul), 反应条件是95度15min, 40 cycles的95度15s, 60度30s, 72度30s. 不知道如何处理,请大家帮忙解决下,谢谢大家!

扩增曲线与标准方程.jpg



溶解曲线.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

向着目标前进!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


蓝慧: 金币+1, 有帮助 2013-05-20 09:26:02
引用回帖:
5楼: Originally posted by 蓝慧 at 2013-05-19 08:00:09
一般来说效率不是要95%-105%之间吗?这个还没有达到要求啊。不知道怎么弄呢...

是稍微超出了一点,不过你的扩增效率是稍微偏高了一点。你可以试试用不同的退火温度。
6楼2013-05-19 12:11:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

zgb1982

木虫 (正式写手)

从哪里看出扩增效率低了
2楼2013-05-18 19:06:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
蓝慧: 金币+1, 有帮助 2013-05-19 08:00:18
蓝慧(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-19 10:24:00
从你的标准曲线方程上的斜率看,扩增效率还不错的吧。
3楼2013-05-19 03:30:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蓝慧

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zgb1982 at 2013-05-18 20:06:20
从哪里看出扩增效率低了

效率不是要达到95%-105%之间吗?这个还是没有达到啊,斜率的话应该还要小一点吧。
向着目标前进!
4楼2013-05-19 07:58:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
信息提示
请填处理意见