| 查看: 3125 | 回复: 10 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
关于双酶切作用时间
|
||
| 我要用BamHⅠ和 SphⅠ做双酶切，切质粒和PCR产物，请问80微升体系的加酶量是多少？需要作用多长时间？我试过两种酶各加2微升，处理8小时，但是还是没有切完全，请问是适当增加酶量还是延长酶切时间呢？ |
回复此楼» 猜你喜欢
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有143人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有3人回复
-
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 有关NEB内切酶NdeI和XhoI的双酶切问题
已经有6人回复
- 双酶切后目的条带很淡，回收不到
已经有15人回复
- 质粒双酶切。。。。。。。
已经有5人回复
- 双酶切没有切开，怎么回事啊
已经有6人回复
- 关于XhoI和SacI双酶切的问题
已经有8人回复
- 关于分步双酶切
已经有7人回复
- 双酶切后目的条带的疑问？
已经有8人回复
- 双酶切后载体片段变小
已经有8人回复
- 双酶切啥都没有？
已经有10人回复
- 双酶切温度控制
已经有7人回复
- 表达载体双酶切
已经有9人回复
- PCR ， 双酶切，连接问题
已经有17人回复
- 双酶切时间怎么确定
已经有9人回复
- 双酶切的选择
已经有8人回复
- 【求助/交流】关于双酶切
已经有6人回复
- 【求助/交流】双酶切求助
已经有19人回复
- 【求助/交流】双酶切质粒后，目的条带浅且前方有模糊亮带
已经有12人回复
- 求双酶切，分步酶切的具体操作步骤
已经有7人回复
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
4楼2013-05-17 08:44:10
2楼2013-05-16 23:03:13
3楼2013-05-16 23:47:58
stevenshi021
新虫 (小有名气)
- 应助: 61 (初中生)
- 金币: 545.3
- 红花: 5
- 帖子: 276
- 在线: 35.1小时
- 虫号: 2272292
- 注册: 2013-02-03
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
不懂sophia(myprayer代发): 金币+1, 感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-17 14:46:03
gyesang: 回帖置顶 2013-05-19 18:18:06
感谢参与，应助指数 +1
不懂sophia(myprayer代发): 金币+1, 感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-17 14:46:03
gyesang: 回帖置顶 2013-05-19 18:18:06
|
有个2楼搞什么不懂不要瞎说，10ul体系加入2ul酶已经20%的体系了，最终体系中含有的甘油10%严重影响酶切效果，一般酶切所加酶量是根据你的DNA量确定的，每种酶都有说明，1u在1h内可以酶切多少质粒DNA或基因组DNA，所以酶量与你的体系没有太大关系，大体系酶切的好处是可以降低你DNA中的杂质以及乙醇对酶的影响（稀释作用），如果你的酶8h还没有切开，这时候你需要考虑的是你DNA的问题，而不是酶切问题。一般所有的酶在1h内都可以切开质粒DNA.酶切翻译不是加入的酶越多越好，有时候恰恰相反。 祝好 |
5楼2013-05-17 10:37:28
5