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不懂sophia

木虫 (初入文坛)

[求助] 关于双酶切作用时间

我要用BamHⅠ和 SphⅠ做双酶切,切质粒和PCR产物,请问80微升体系的加酶量是多少?需要作用多长时间?我试过两种酶各加2微升,处理8小时,但是还是没有切完全,请问是适当增加酶量还是延长酶切时间呢?
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光树林

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
不懂sophia(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-17 14:45:46
我一般10ul加入2ul的酶,楼主可以试试加入10ul 的酶。。。不过建议楼主缩小反应体系,50ul试试看,酶切8小时应该是足够的。还有你用的缓冲液是否对两种酶都适用
一路向北
2楼2013-05-16 23:03:13
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