24小时热门版块排行榜    

查看: 1789  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xuqingchun33

银虫 (小有名气)

[求助] pcr引物二聚体

甲基化pcr的目的产物为100bp,但是总有引物二聚体,TM我已经做了梯度了
takala taq酶0.5ul
10xbuffer   2.5ul
dNTP           2ul
水                13ul
模版           5ul
DMSO         1ul
引物各      0.5ul
25ul体系
预变性95度5min
各位高手请问我该怎么办,帮忙给点意见

1.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

在这个纷绕的世俗世界里,能够学会用一颗平常的心去对待周围的一切,也是一种境界。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guojing113

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xuqingchun33(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-14 11:02:44
把你的引物降低到0.3微升,如果目的序列GC含量没有超过65%的话,把DMSO去掉,DMSO是可以影响扩增效率的,另外如果还是不可以的话,在体系里面加2mM的镁离子,祝好运!
听雨
6楼2013-05-14 10:25:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

华农夏田

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我之前也遇到了类似的问题,师兄说是不可避免的,可以换一下引物或者把引物沸水浴5min,在冰浴1min,试试看吧!希望有所帮助。
要科研也要生活
2楼2013-05-13 16:51:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangxin320

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xuqingchun33(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-14 11:02:35
重新设计一下引物吧,设计的时候看看软件上面显示出现dimer的情况,选择没有的就最好了
3楼2013-05-13 17:52:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

叶伟伟99

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以换个KOD酶试试,
4楼2013-05-13 22:01:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 总分293求调剂 +3 加一一九 2026-03-25 3/150 2026-03-25 10:49 by JourneyLucky
[考研] 086003食品工程求调剂 +6 淼淼111 2026-03-24 6/300 2026-03-25 10:29 by 3Strings
[考研] 298求调剂 +3 Rong$$$ 2026-03-18 3/150 2026-03-25 10:13 by userper
[考研] 289材料与化工(085600)B区求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:20 by mx.yue
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 0854 考研调剂 招生了!AI 方向 +5 pk3725069 2026-03-19 17/850 2026-03-24 17:30 by zhouxuan..
[考研] 材料专硕331求调剂 +4 鲜当牛 2026-03-24 4/200 2026-03-24 15:58 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华东理工大学081700,初试分数271 +5 kotoko_ik 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:29 by 学术搬砖er
[考研] 070300,一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
[考研] 一志愿东华大学化学070300,求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 一志愿华中科技大学071000,求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 308求调剂 +3 阿姐阿姐家啊 2026-03-18 3/150 2026-03-20 23:24 by JourneyLucky
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
信息提示
请填处理意见