24小时热门版块排行榜    

查看: 1433  |  回复: 2

lihaiyan0208

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求高手解惑:重组质粒酶切检验不出来

我做重组质粒的酶切验证,pcr检测时结果正确,有目的片段。但是用双酶切检验时,只有目的条带位置一条带,按理论应该在目的条带上面还有一个条带的。单酶切验证也是比理论少一条条带。
我的目的片段大概2600bp,载体用的是pc1301,酶切时间是6小时,酶切体系为
质粒       5ul                 质粒    5ul             质粒   5ul
sma I      1ul                 Apa I   1ul             Sph I   1ul
spe I       1ul                 Sac I    1ul                  
T Buffer  2ul                 L  Buffer 2ul           H Buffer 2ul
BSA        2ul
加水至   20ul               
图片中M为15000,2和5为未酶切的质粒,3和7是Sma I/Spe I 双酶切的结果,4和8为Apa/Sac I酶切,5和9为Sph I单酶切结果。求高手指点,怎么回事?

4X(EX2OQE(Q9M{Y1$92FLLY副本.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bolysu

禁虫 (著名写手)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

2楼2013-05-10 21:42:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihaiyan0208

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bolysu at 2013-05-10 21:42:33
质粒太少了,目的基因量少是看不出来的

质粒浓度比较高加5ul的话就有将近1ng了,所以这个应该不是质粒浓度的关系,而且我的目的条带应该是在的,就是Marker从下往上数第三条带那个地方的那个条带。
3楼2013-05-10 22:42:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lihaiyan0208 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-09-02 00:19 by xiangy672
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
信息提示
请填处理意见