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15376763881

新虫 (小有名气)

[求助] Pet28-a载体的his标签多大啊

我做原核表达。目的蛋白大约18kd,连到 pet28-a载体。载体有his标签。内切酶为 ecor1和xho1.sd-page电泳后蛋白加标签应该多大啊? 初学者,不懂计算方法。望虫友指教。谢。
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cute_man

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-05-08 20:16:19
15376763881: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢您 2013-05-09 08:47:23
15376763881: 回帖置顶 2013-05-09 08:53:46
15376763881: 金币+2, ★★★★★最佳答案 2013-05-09 08:54:03
一般是6个his标签,表达的时候从Nco1的Met开始表达,到你的上游酶切位点EcoR1是105bp左右的碱基,按氨基酸残基平均大小128d计算,大概是4480d。
这个可以看质粒图谱算的,网上可以down图谱的。
2楼2013-05-08 20:15:08
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jjnch

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
15376763881: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢。 2013-05-09 08:48:14
你的蛋白大小加上前面36个氨基酸的分子量(4kD=110*360)。平均分子量128-18.
3楼2013-05-08 20:49:35
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