应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR电泳图求助。。
51/1返回列表
查看: 673  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

liulugang

木虫 (小有名气)

[求助] PCR电泳图求助。。

分子新手，最近做的PCR，为什么总是扩增出这样的条带？这是什么都木有扩增出来吗？

IMG_0003.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-05-06 21:34:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xjtu0025

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
liulugang: 金币+1 2013-05-07 14:27:17
请提高退火温度.特异性条带过多造成
赞一下 回复此楼
2楼2013-05-06 22:58:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冰封之real

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
liulugang: 金币+2 2013-05-07 14:27:00
我也遇到过类似情况。一般原因就是非特异性扩增，也就是说你的引物不好用。如果你P的是菌液，还有可能是菌液过浓，蛋白含量太高。还用一种可能（比较低），你点样的时候loadingbuffer加的不够，样品没有沉到胶孔里，结果电泳的时候挂在孔上了。
顺便说一句，从你跑出的marker来看，这块胶做的不太均匀，琼脂糖明显没融好。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2013-05-07 09:38:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulugang

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 冰封之real at 2013-05-07 09:38:53
我也遇到过类似情况。一般原因就是非特异性扩增，也就是说你的引物不好用。如果你P的是菌液，还有可能是菌液过浓，蛋白含量太高。还用一种可能（比较低），你点样的时候loadingbuffer加的不够，样品没有沉到胶孔里， ...

我做的是57-66的梯度，pcr。引物设计直接用的人家文献里的，扩增的是文献作者赠与的菌上的基因。
赞一下 回复此楼
4楼2013-05-07 14:24:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

saimintc

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
liulugang: 金币+2, ★有帮助 2013-07-16 20:14:42
第三行最上面不是有一个条带么。
退火不用太在意TM值，一般55度都可以的。（做点突变pcr的primer的tm值普遍75以上，也照样用55度无压力）
混合的时候在冰上混合，而且别怕麻烦多混几下。
循环数不要太高，一般循环数太高就出现这种拖带。
赞一下 回复此楼
5楼2013-05-07 15:06:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liulugang 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 10/500 2026-08-29 16:49 by zICmwzsBXjbN
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 16:31 by 时光旅行者
[基金申请] 面上意见出来了 +6 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 10/500 2026-08-29 15:50 by 微不足道士
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +9 苏东坡二世 2026-08-23 9/450 2026-08-29 14:41 by hustersqt
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 14:23 by jCd0dEvKHShX
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-29 14:15 by jCd0dEvKHShX
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-29 14:03 by jCd0dEvKHShX
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 11:51 by jCd0dEvKHShX
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 11:49 by jCd0dEvKHShX
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 11:40 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +3 349506619 2026-08-28 3/150 2026-08-29 10:49 by 木风9012
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-29 09:26 by G6APbkg8SA6w
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭