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Francis_zw

铜虫 (初入文坛)

[求助] 平板能长,挑单克隆却不长啊啊啊啊啊

小弟刚做的转化,平板长的很好,挑取单克隆到5ml LB中培养,长势不错,但后几次却不行(一个礼拜内),后有虫友说是杂菌污染了平板,那么我再次把上次做转化的EP管拿出来取100ul 涂布在Amp 100ug/ml的平板上(调大筛选压力),待平板长好后,昨天晚上挑单克隆到5ml  LB 中,今天早上还是澄清,我晕,出了鬼了,这是?~
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沙门小rna

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-27 17:01:26
引用回帖:
4楼: Originally posted by Francis_zw at 2013-05-05 12:13:53
才3-4天的事情呀,应该没这么快吧,我的Amp筛选压力已经提到100ug/ml了。...

我们都用200的浓度的亲- -。。。。还有看你下面的说的冷冻的问题。那就是说你的质粒是温度敏感性的。我记得有质粒是在低温下或者高温下丢失的,应该是这么回事吧~
应助之星就是我~没错。你没有看错~
12楼2013-10-27 11:27:41
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沙门小rna

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2013-10-29 16:48:12
引用回帖:
11楼: Originally posted by 小WAY at 2013-10-26 16:36:40
冷冻的LB?我也遇到这种情况,求解释一下...

有的质粒是温度敏感型的,可以在一定温度(比如高温 或者低温下)丢失。例子:自杀质粒等等~
应助之星就是我~没错。你没有看错~
13楼2013-10-27 11:29:18
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