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279696866

银虫 (小有名气)

[求助] 我提的质粒跑出来怎么这样的啊

用试剂盒提取的,怎么这个样子啊,酶切完再跑就都没有了啊,第一张是质粒,第二张是酶切好以后的

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[ Last edited by 279696866 on 2013-5-3 at 19:13 ]
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HTGe

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 回帖置顶 2013-05-04 13:19:22
279696866(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-04 13:19:35
质粒提的不纯,或者根本就没提出来你要的质粒;纯的质粒应该是整齐的三条带,最前端的带(超螺旋)最亮;你提的应该不是质粒,很有可能是DNA片段污染,或者是RNA片段污染(检查是否加RNAse),酶切后没有带了说明DNA或RNA片段都降解了。楼上说离子浓度太大,这个是有可能的;记得以前我有个师妹,第一次提质粒,买来的试剂盒洗脱液中没加乙醇,就直接用了,提出来的就是跟你一样的条带;建议楼主再提一次,看看试剂盒中该加的都是都加了没,正常操作应该很简单就能提出来很纯的质粒,祝好运!
8楼2013-05-04 12:33:04
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意孤城_

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
279696866(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-03 23:14:18
建议从新提取质粒,严格按说明书上操作,控制溶液II的时间和摇动剧烈程度
2楼2013-05-03 23:05:35
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
上样量有些大,可能含盐量也有些高。
3楼2013-05-04 00:41:31
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279696866

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 意孤城_ at 2013-05-03 23:05:35
建议从新提取质粒,严格按说明书上操作,控制溶液II的时间和摇动剧烈程度

为何酶切好了以后会成这样啊
4楼2013-05-04 10:49:49
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