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ggyy0911

铁虫 (正式写手)

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[求助] 真菌传代培养后抑菌活性会降低吗？

不知道组里有没有做真菌的，我养的真菌第一次做抑菌试验的时候，效果很好，用的打孔法，那个时候也养了挺久了，不过基本上都不是保种了之后活化的，大概是纯化之后转接了两三次的样子。
  之后上摇床提发酵液，发酵液做了滤纸片法，效果不好。
  一个月前我又做了一次打孔法，完全无效，一点抑菌圈都没有；当时把常用的牛肉膏蛋白胨培养基换成了LB培养基，怀疑是培养基的问题，可能不大适合真菌生长。
  我查了一些文献，找不到用其他培养基的，设计到真菌的抑菌试验，指示菌是大肠杆菌和金葡的，都用的牛肉膏蛋白胨。
  我前天又做了一次，牛肉膏蛋白胨培养基，大肠杆菌和金葡，一个平板30微升菌液，1.5ml的离心管，两接种环的量。完全无效。
  我这次做的都是保种之后再接的，但长的还是很好，10个里只有一个长的有点变了。
  所以我相当的纠结啊，真菌养久了抑菌活性会丧失的吗？看了好多研究抑菌活性的文献，没有提到培养时间也是影响因素的。
  求高人赐教好么！！！
  真菌不好养啊，真心不想从头再来啊！！

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1楼 2013-05-02 18:17:26

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ggyy0911

铁虫 (正式写手)

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引用回帖:

6楼: Originally posted by 空云不留痕 at 2013-05-03 12:49:10
菌种分为标准储藏菌株和工作菌株，你用来做实验的就用工作菌种；用来传代的就使用标准储藏菌株；如果用量大，可以一次性多传点工作菌株。
楼主可以梳理一下自己的试验：1. 培养基问题：LB一般用来培养细菌，真菌建 ...

我现在做的工作和你假定的是相反的，我是从植物中分离出真菌，纯化之后，再去确定它是什么菌株。没得到发酵液和菌丝之前，我没法提DNA，也就谈不上比较。相当于我现在在鉴定一株未知的真菌。
  用LB是因为抑菌试验里我需要培养细菌，只培养真菌的时候我都用的是PDA。
  细菌确实需要再检验一下了。
  非常感谢。