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ggyy0911

铁虫 (正式写手)

[求助] 真菌传代培养后抑菌活性会降低吗?

不知道组里有没有做真菌的,我养的真菌第一次做抑菌试验的时候,效果很好,用的打孔法,那个时候也养了挺久了,不过基本上都不是保种了之后活化的,大概是纯化之后转接了两三次的样子。
  之后上摇床提发酵液,发酵液做了滤纸片法,效果不好。
  一个月前我又做了一次打孔法,完全无效,一点抑菌圈都没有;当时把常用的牛肉膏蛋白胨培养基换成了LB培养基,怀疑是培养基的问题,可能不大适合真菌生长。
  我查了一些文献,找不到用其他培养基的,设计到真菌的抑菌试验,指示菌是大肠杆菌和金葡的,都用的牛肉膏蛋白胨。
  我前天又做了一次,牛肉膏蛋白胨培养基,大肠杆菌和金葡,一个平板30微升菌液,1.5ml的离心管,两接种环的量。完全无效。
  我这次做的都是保种之后再接的,但长的还是很好,10个里只有一个长的有点变了。
  所以我相当的纠结啊,真菌养久了抑菌活性会丧失的吗?看了好多研究抑菌活性的文献,没有提到培养时间也是影响因素的。
  求高人赐教好么!!!
  真菌不好养啊,真心不想从头再来啊!!
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ggyy0911

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 空云不留痕 at 2013-05-03 12:49:10
菌种分为标准储藏菌株和工作菌株,你用来做实验的就用工作菌种;用来传代的就使用标准储藏菌株;如果用量大,可以一次性多传点工作菌株。
楼主可以梳理一下自己的试验:1. 培养基问题:LB一般用来培养细菌,真菌建 ...

我现在做的工作和你假定的是相反的,我是从植物中分离出真菌,纯化之后,再去确定它是什么菌株。没得到发酵液和菌丝之前,我没法提DNA,也就谈不上比较。相当于我现在在鉴定一株未知的真菌。
  用LB是因为抑菌试验里我需要培养细菌,只培养真菌的时候我都用的是PDA。
  细菌确实需要再检验一下了。
  非常感谢。
7楼2013-05-03 16:59:27
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heyj1234

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有可能是菌种退化。重新活化!
激情的时代
2楼2013-05-02 18:49:18
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空云不留痕

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励新虫应助交流! 2013-05-02 21:31:33
按照中国药典规定,菌种传代不得超过五代,楼主是否传代数太多了?导致菌种退化或变异?新活化的菌种有没做鉴定?若污染到杂菌,影响后续传代!另外真菌一般都蛮好养,至少比细菌好养!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2013-05-02 21:23:52
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zhanqgao

禁虫 (知名作家)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

4楼2013-05-03 08:41:03
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