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ggyy0911铁虫 (正式写手)
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[求助]
真菌传代培养后抑菌活性会降低吗?
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不知道组里有没有做真菌的,我养的真菌第一次做抑菌试验的时候,效果很好,用的打孔法,那个时候也养了挺久了,不过基本上都不是保种了之后活化的,大概是纯化之后转接了两三次的样子。 之后上摇床提发酵液,发酵液做了滤纸片法,效果不好。 一个月前我又做了一次打孔法,完全无效,一点抑菌圈都没有;当时把常用的牛肉膏蛋白胨培养基换成了LB培养基,怀疑是培养基的问题,可能不大适合真菌生长。 我查了一些文献,找不到用其他培养基的,设计到真菌的抑菌试验,指示菌是大肠杆菌和金葡的,都用的牛肉膏蛋白胨。 我前天又做了一次,牛肉膏蛋白胨培养基,大肠杆菌和金葡,一个平板30微升菌液,1.5ml的离心管,两接种环的量。完全无效。 我这次做的都是保种之后再接的,但长的还是很好,10个里只有一个长的有点变了。 所以我相当的纠结啊,真菌养久了抑菌活性会丧失的吗?看了好多研究抑菌活性的文献,没有提到培养时间也是影响因素的。 求高人赐教好么!!! 真菌不好养啊,真心不想从头再来啊!! |
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【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
ggyy0911: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-05-17 00:43:06
ggyy0911: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-05-17 00:43:06
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菌种分为标准储藏菌株和工作菌株,你用来做实验的就用工作菌种;用来传代的就使用标准储藏菌株;如果用量大,可以一次性多传点工作菌株。 楼主可以梳理一下自己的试验:1. 培养基问题:LB一般用来培养细菌,真菌建议使用PDA(如果您参考的标准方法是LB,那就另当别论了);2.菌种问题:除上述问题外,请问楼主菌种来源是否稳定,是ATCC的菌还是哪里的?活化方法是否按照标准要求进行?购买的菌种有没有做过相应特征鉴定,即如何确定你买的就是所需菌种; 3. 貌似还涉及到E.Coli和金葡,这两种细菌有没有变异或污染,比如该真菌只对E.Coli和金葡敏感,万一这两个细菌已经污染变成其他杂菌了,抑菌性能自然就改变了; 暂时说这么多了,楼主还是列出可能的原因逐一排除。上面这些如果忽略掉,那么后续发酵试验做了也是白搭。 |
6楼2013-05-03 12:49:10
heyj1234
金虫 (职业作家)
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2楼2013-05-02 18:49:18
3楼2013-05-02 21:23:52
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4楼2013-05-03 08:41:03







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