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ggyy0911

铁虫 (正式写手)

[求助] 真菌传代培养后抑菌活性会降低吗?

不知道组里有没有做真菌的,我养的真菌第一次做抑菌试验的时候,效果很好,用的打孔法,那个时候也养了挺久了,不过基本上都不是保种了之后活化的,大概是纯化之后转接了两三次的样子。
  之后上摇床提发酵液,发酵液做了滤纸片法,效果不好。
  一个月前我又做了一次打孔法,完全无效,一点抑菌圈都没有;当时把常用的牛肉膏蛋白胨培养基换成了LB培养基,怀疑是培养基的问题,可能不大适合真菌生长。
  我查了一些文献,找不到用其他培养基的,设计到真菌的抑菌试验,指示菌是大肠杆菌和金葡的,都用的牛肉膏蛋白胨。
  我前天又做了一次,牛肉膏蛋白胨培养基,大肠杆菌和金葡,一个平板30微升菌液,1.5ml的离心管,两接种环的量。完全无效。
  我这次做的都是保种之后再接的,但长的还是很好,10个里只有一个长的有点变了。
  所以我相当的纠结啊,真菌养久了抑菌活性会丧失的吗?看了好多研究抑菌活性的文献,没有提到培养时间也是影响因素的。
  求高人赐教好么!!!
  真菌不好养啊,真心不想从头再来啊!!
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空云不留痕

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励新虫应助交流! 2013-05-02 21:31:33
按照中国药典规定,菌种传代不得超过五代,楼主是否传代数太多了?导致菌种退化或变异?新活化的菌种有没做鉴定?若污染到杂菌,影响后续传代!另外真菌一般都蛮好养,至少比细菌好养!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2013-05-02 21:23:52
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heyj1234

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有可能是菌种退化。重新活化!
激情的时代
2楼2013-05-02 18:49:18
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zhanqgao

禁虫 (知名作家)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

4楼2013-05-03 08:41:03
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ggyy0911

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 空云不留痕 at 2013-05-02 21:23:52
按照中国药典规定,菌种传代不得超过五代,楼主是否传代数太多了?导致菌种退化或变异?新活化的菌种有没做鉴定?若污染到杂菌,影响后续传代!另外真菌一般都蛮好养,至少比细菌好养!
...

真菌也规定不能传过五代?!那这个问题怎么避免呢?纯化之后保种,然后活化使用之后再次保种吗?因为保的种还是有可能出问题的啊,比如用的次数太多不够用了,或者活化取菌时不小心污染了之类。
  真菌确实可视性比较强,关键细菌长半天,真菌最少长5天啊!!
  此外我现在养的这一批还不涉及鉴定,我是准备提了发酵液之后,再去鉴定,关键就是它现在让我觉得它都变性了,再去鉴定不知道还有没有意义。
5楼2013-05-03 10:39:19
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