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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助，质粒电转染相关问题。
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lee_炎

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助，质粒电转染相关问题。

最近做电转染，将GFP质粒转染到细胞中。结果发现将电击后的细胞转移到孔板上后，细胞都死掉了。也许这是电压高的原因，但我在做的过程中有些步骤有很大问题，希望大家能提点建议或意见。

比如：电击后将细胞转移到孔板的时候，由于用的是0.2cm的电击杯，所以无法将里面的细胞完全吸出来，这也就会导致细胞损失，我想这一步会不会损失很多细胞呢，请问大家都是用什么方法转移的呢？

另外，在将细胞离心沉淀，然后离心，清洗再离心的这一步，大家是如何做才能让细胞的损失降到最低呢？

实验不顺利，好纠结啊。。。
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1楼 2013-04-26 14:24:09
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匿名

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3楼2014-05-24 21:35:44
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
电击后应该立即加入培养液，否则细胞死得很快的。我用的是玻璃吸管，伸到0.2cm的杯子底部完全没有问题。一般有两个做法，一个是直接往电击杯里加1ml培养液，然后再转移到试管里复苏。一个是快速用消毒好的玻璃吸管转移到装有1ml培养液的试管里进行复苏。
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2楼2013-04-27 09:13:02
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