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shixiaba

至尊木虫 (正式写手)

应助: 42 (小学生)
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专业: 无机纳米化学

[求助] 金纳米粒子的标记

按照文献方法16nm金纳米粒子标记IgG和DNA（AuNPs调节至碱性后加IgG，反应20min，加入巯基DNA，摇5min后4摄氏度过夜），出现了下述问题：
标记好的金纳米粒子在高盐度下不会聚沉，第一次离心后可以重新分散，可第二次不论在水、含有0.05%吐温PBS或是在0.1%BSA中离心后发生贴附离心管壁的现象。
为了验证，做过只标记饱和量IgG的AuNPs，可以正常离心两次，第三次离心在上述三种体系中同样会贴壁。
IgG和DNA的双标文献中有很多报道，但是不知道为什么不能成功。求高人帮助。谢谢！

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1楼 2013-04-24 22:16:50

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xiaobu0527

金虫 (小有名气)

应助: 7 (幼儿园)
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专业: 环境分析化学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
shixiaba: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 很有帮助～ 2013-04-25 11:08:57

你换个溶液，没有给它一个稳定的条件，它就聚集了。
纳米粒子表面会吸附带负电荷的柠檬酸根粒子，具有负电荷，在库伦排斥的作用下才能相对稳定存在在溶液中，当你离心完，加入其它的溶剂，纳米粒子表面的柠檬酸根粒子脱附，表面负电荷减少，纳米粒子间的排斥力减少，就会聚集。本来你的纳米粒子溶液是澄清的，但是你如果离心完再加其它溶液，它无法稳定，你会发现贴在壁上的已经是聚集体的，也就是它的粒径都变化了。
从能量的角度而言，纳米粒子是不稳定的，趋向于形成聚集体，所以必须给它吸附带电荷的离子，让它通过相互排斥稳定存在于溶液中，不至于沉淀。