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821078607

银虫 (小有名气)

[求助] 有关细胞总RNA提取

各位虫友:
大家好!
请教一个问题,我使用TRAZOl试剂提取细胞总RNA进行细胞因子测定,采用了多种不同的方式处理细胞,本来应该增加的细胞因子却呈现降低趋势,怀疑是RNA提取出现了问题,电泳进行了表征,很怪异。但是我将PCR之后的内标actin进行电泳,很正常,PCR是均在18左右出峰,不知道总RNA提取是否是失败,现附上电泳图请大家帮忙分析一下。

对细胞不同处理后12种样品的总RNA电泳图.jpg



12种样品actin的电泳图.png
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
821078607: 金币+5, 谢谢 2013-04-25 20:24:23
提的好的RNA应该是这样子的,请见贴子http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=5797357&authorid=849017的回复

你110V跑40min,太久了,你可以160V 跑10min,RNA不宜跑时间太长
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
9楼2013-04-24 17:32:17
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查看全部 17 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
821078607: 金币+5, 有帮助, 谢谢 2013-04-25 20:25:09
感觉你的RNA质量不行。电泳的上样量是多少?
2楼2013-04-24 04:45:33
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jwucn

至尊木虫 (文坛精英)

..........................帮您顶一个...................................
3楼2013-04-24 07:37:30
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
821078607: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢 2013-04-24 17:22:19
gyesang: 金币+1, 鼓励应助! 2013-04-24 17:28:56
821078607: 金币+5, 有帮助, 谢谢 2013-04-25 20:24:50
你是怎么检测细胞因子的表达呢?后续做qRT-PCR么?虽然RNA有些降解,但我觉得内参P出来挺好的,所以这个RNA也可以用来做后续的实验。。。因为它并不是完全降解了。。。
keepon
4楼2013-04-24 10:00:09
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