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weizhi111

至尊木虫 (正式写手)

[求助] 蛋白电泳图分析求教

想把蛋白切胶,原先的蛋白是包涵体,在尿素中的。所以先过夜透析(共17小时),浓缩后上样跑胶,结果图很奇怪。目的蛋白条带极弱(胶图上从上到下第一条带是目的带),与检测的浓度不符,测的浓度大约800ug/ml左右,上样300ul,但是从图上看根本没那么多蛋白。而且胶的下缘一大片不知道是什么,是尿素没透干净吗?浓缩后也发现有很多白色絮状的东西析出来,煮样后又溶解了,我原来以为是蛋白呢,现在看来应该不是。求各位赐教!还有,请有经验的同志帮忙目测下我的目的蛋白总共有多少?拜托各位啦!(注:胶是1.5mm厚的那种,没插梳子,用于切胶)

浓缩 析出-2 4-20.jpg
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菱霖飞飞飞

新虫 (初入文坛)

我觉得你极有可能是在透析的过程中蛋白沉淀了,极有可能是沉淀在透析袋上,bradford法检测浓度时试试先4℃离心10min后取上清再测,如果离心后所测上清的浓度明显下降了,就应该是蛋白沉淀了以小颗粒的形式悬浮在溶剂中导致还是能测得到浓度,建议你试试,另外想请教您一下您是如何上传这张图片的?我想发帖但是上传不了图片
4楼2019-07-08 15:49:05
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