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fanchuannan

铜虫 (小有名气)

[求助] 为何SDS-PAGE电泳进入分离胶电流要变大

RT,为何浓缩胶是电流要小些,是为了更好的浓缩么?那分离胶为何要变大,是因为分离胶较大可以跑快些么?
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Tomakeeachdaycount。
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curiousdog

银虫 (小有名气)

glycine在ph6.8时带负电荷少,是电泳后沿,氯离子位于电泳前沿,蛋白位于二者之间。氯离子和glycine之间形成了局部高电场,把蛋白挤压成一条较细的条带。进入分离胶后ph变为8.8,glycine带负点多,跟氯离子一起跑到电泳最前沿,蛋白就在正常电压下往正极迁移,并且根据分子量的不同被分离。
跑蛋白胶电压不是最重要的,我经常220V跑到底。关键的是浓缩胶和分离胶的ph。
理可顿悟,事须渐修。
14楼2013-04-22 17:38:29
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zhaolf

木虫 (著名写手)

胖虎爱唱歌

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fanchuannan: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-04-20 13:00:18
myprayer: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香,分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-20 13:03:31
fanchuannan: 金币+2 2013-04-22 12:23:29
首先,驱动力不是电流而是电压,由于增大电流也同时增大了电压,所以效果是类似的.
在stacking胶里,之所以被压成了一条线,是因为gylcine电导梯度,所以stacking gel的pH是6.8,很接近gylcine的等电点,低电压让梯度形成的更好,跑得慢一点压得更紧.而进入了resolving gel后, pH变成了8.8,梯度不再存在,于是增大电压让蛋白放开了跑,省时间.要是愿意低电压跑,也没问题,就是慢点呗
我是胖虎,我是孩子王!
2楼2013-04-20 02:25:51
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fanchuannan

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaolf at 2013-04-20 02:25:51
首先,驱动力不是电流而是电压,由于增大电流也同时增大了电压,所以效果是类似的.
在stacking胶里,之所以被压成了一条线,是因为gylcine电导梯度,所以stacking gel的pH是6.8,很接近gylcine的等电点,低电压让梯度形成的 ...

回答很到位,谢谢!
Tomakeeachdaycount。
3楼2013-04-20 13:00:02
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panyuzhu

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

4楼2013-04-21 10:25:08
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