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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 菌种 保藏 活化
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chouzhou

新虫 (初入文坛)

[求助] 菌种 保藏 活化

我想问一下，因为有周末，我想把刚培养出来的斜面固体培养基放进冰箱里，过两天才拿出来，是否需要重新活化？还有就是液体和固体培养基在冰箱4摄氏度大概能保藏多久啊？俺是菜鸟，请大家多多指教！~~
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1楼 2013-04-17 16:10:37
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user59888

金虫 (文坛精英)

宫创始人 ------小妮

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhangxingc: 金币+1, 欢迎常到微生物版 2013-04-18 08:59:58
菌种活化与保存的方法
1.菌种活化：
一.配置菌种适宜生长的培养基
二.将菌种从保藏状态恢复到室温状态，比如将冷冻的菌种解冻
三.将保藏的菌种接种到培养基中培养
四.挑选形状良好的菌落，接种到新的培养基中培养，重复此步骤2-3次，通过一些理化指标得到优良的菌落。
2.菌种保存：常用的菌种保存方法包括：普通冰箱保存法、液体石蜡法、沙土管法、真空冷冻干燥法、液氮超低温保藏法。
1 普通琼脂斜面冰箱保存法：将培养成熟的斜面或平板置于4℃冰箱中，一般可保存一个月，每月传代一次。
2 液体石蜡法：将细菌接种于琼脂半固体或血清琼脂半固体内，培养成熟，再以无菌方法加入灭菌的液体石蜡。高度约lcm，置4℃冰箱保存。保存时间可达3～6个月。
3  沙土管法保存：将沙或土过筛﹑烘干﹑装管﹑灭菌﹑然後将菌种制成孢子悬液滴入其中混匀﹐放到盛氯化钙的干燥器里吸除水分﹐干燥後保存或用火焰封管保存。可保存较长时期。
4  真空冷冻干燥法：将细胞悬液每0.1～0.2毫升注入一无菌安瓿瓶﹐于-40℃预冻1小时﹐再于-20～30℃﹑真空度为13.3帕的条件下脱水，用火焰溶封﹐置10℃保存，可长期保存。
5  液氮保存法：用甘油或二甲亚(DMSO)作保护剂制备细胞悬液﹐分装入无菌安瓿瓶﹐每管0.2毫升﹐在控制温度下降速率为1℃/分钟的条件下预冻至-40℃﹐然後立即放入液氮生物贮存罐中气相(-150℃)保存。微生物的大多数属种适于慢速冻结和快速解冻。
　　
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此人已死，没烧纸的半夜出来喝酒
4楼2013-04-18 08:06:54
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_小小鸟

金虫 (正式写手)

御林军

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-04-17 20:30:39
菌不同他的生理活性也是不同的，不过如果是两三天的话应该没问题不需要活化。
对于培养基来说最好是现配现用，如果存放的话，无机盐培养基应该没问题。如果是营养比较丰富的，如LB，灭菌后液体储存时间大约1周以上，固体可以更长一点，但也要看你的业务水平，有的人在操作过程中不注意，或是灭菌不彻底很快就会看到大霉菌长出来的。
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一米阳光照大地。。。
2楼2013-04-17 17:41:09
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wjm2010

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhangxingc: 金币+1, 欢迎常到微生物版 2013-04-18 08:59:35
跟你的培养基种类有关，不同培养基存放时间不同，如TSA，杀菌彻底的话，放2周问题的
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小小虫
3楼2013-04-18 00:25:44
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chouzhou

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by _小小鸟 at 2013-04-17 17:41:09
菌不同他的生理活性也是不同的，不过如果是两三天的话应该没问题不需要活化。
对于培养基来说最好是现配现用，如果存放的话，无机盐培养基应该没问题。如果是营养比较丰富的，如LB，灭菌后液体储存时间大约1周以上 ...

不好意思，我表述有问题了，应该是含菌种的固体或液体培养基可以在4摄氏度里保藏多久？
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5楼2013-04-18 10:17:49
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