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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞计数加液时不能充满小室
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bddtx

铜虫 (初入文坛)

[求助] 细胞计数加液时不能充满小室

最近经常要细胞计数，六孔板每个孔都计，但是每次计数我都要花很久，遇到最困难的一个问题是有时候往细胞计数器中加细胞悬液，不能充满小室，往小室的两边流但中间有一小块区域无细胞悬液，不知道为什么？我把计数器和盖玻片都擦的挺干净了。而且有时候计数四个大格不均匀，怎样可以更均匀呢？
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做最好的自己
1楼 2013-04-15 22:44:27
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美丽传说

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
取样前再吹打几下混匀，然后快速取样计数。
如果加样量控制不好的话，就用10ul的移液枪，吸10ul，全部加进去，就可以了。
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2楼2013-04-16 08:33:52
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bunny0512

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2013-04-17 08:35:49
你说的擦的很干净是怎么擦的？我是水洗，蒸馏水再洗，而且盖玻片基本都是一次性的新的，用一次就丢掉了，计数板不行用酒精洗洗，用干净的擦手纸吸水。
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在哪里~在哪里见过你~
3楼2013-04-16 09:53:12
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bddtx

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 美丽传说 at 2013-04-16 08:33:52
取样前再吹打几下混匀，然后快速取样计数。
如果加样量控制不好的话，就用10ul的移液枪，吸10ul，全部加进去，就可以了。

我是取前吹打过的，而且用的20ul的枪，吸取10ul
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做最好的自己
4楼2013-04-16 22:57:13
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bddtx

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by bunny0512 at 2013-04-16 09:53:12
你说的擦的很干净是怎么擦的？我是水洗，蒸馏水再洗，而且盖玻片基本都是一次性的新的，用一次就丢掉了，计数板不行用酒精洗洗，用干净的擦手纸吸水。

我们实验室有酒精喷壶，我喷的70%酒精，然后用无尘纸擦，我仔细检查过应该没有什么纸屑。。。盖玻片是玻璃的，这个要是用完就扔成本就太高了，我们这个应该是可以重复用的
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做最好的自己
5楼2013-04-16 22:58:51
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美丽传说

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by bddtx at 2013-04-16 22:57:13
我是取前吹打过的，而且用的20ul的枪，吸取10ul...

那就应该是你加样时，有空气进入了，这没关系，把计数板擦干净，重新加样就好
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6楼2013-04-17 08:34:46
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bunny0512

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by bddtx at 2013-04-16 22:58:51
我们实验室有酒精喷壶，我喷的70%酒精，然后用无尘纸擦，我仔细检查过应该没有什么纸屑。。。盖玻片是玻璃的，这个要是用完就扔成本就太高了，我们这个应该是可以重复用的...

盖玻片我试过，不管怎么擦，基本用个两三次就不行了。。你这样，试试用个新的，用个旧的，对比下，盖玻片我感觉成本倒不是很大吧。。一小盒几十片呢。。。国产的一次性，进口的可以多用几次
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在哪里~在哪里见过你~
7楼2013-04-17 09:06:16
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bddtx

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 美丽传说 at 2013-04-17 08:34:46
那就应该是你加样时，有空气进入了，这没关系，把计数板擦干净，重新加样就好...

哦，是吗，我记得自己擦得挺干净的，下次我注意点，谢啦！
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做最好的自己
8楼2013-04-18 21:10:24
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bddtx

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by bunny0512 at 2013-04-17 09:06:16
盖玻片我试过，不管怎么擦，基本用个两三次就不行了。。你这样，试试用个新的，用个旧的，对比下，盖玻片我感觉成本倒不是很大吧。。一小盒几十片呢。。。国产的一次性，进口的可以多用几次...

哦，我们用的是那种硬质玻璃好像，我后来换了一个，还是会出现这种情况不知道为什么
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做最好的自己
9楼2013-04-18 21:11:30
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wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
silicare: 金币+5, BioEPI+1, 应助指数+1, 谢谢参与 2013-04-20 08:34:00
计数板用酒精浸泡24小时后，取出，用无纺布或者超细纤维布擦干，盖玻片也如此操作。
细胞计数前用培养基吹打混匀，力度要小，速度要慢，要在培养基内操作，不要打出气泡。
吸取10μl的量，用吸水纸在盖玻片另一边吸一下，别吸过了，经验活。
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10楼2013-04-19 14:34:21
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