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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 聚丙烯酰胺凝胶电泳跑蛋白质
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wo1shi_hm

金虫 (小有名气)

[求助] 聚丙烯酰胺凝胶电泳跑蛋白质

最近半个月都在摸索凝胶电泳，女子不才，都以失败告终，觉睡不好饭吃不香，所以想向哪位大侠请教一下。我是用聚丙烯酰胺凝胶电泳跑的蛋白质，蛋白质用的等电点为7.2的限制性内切酶，即EcoRI,可是跑完之后发现蛋白质跑不下来，还在插梳子的地方，7.2的蛋白质是中性蛋白质吗？必须带电才可以跑吗？
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1楼2013-04-12 16:18:59
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wo1shi_hm(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-13 10:22:05
跑的是变性胶（SDS-PAGE）还是非变性胶？
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2楼2013-04-13 05:37:25
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

蛋白质在电泳时动都不动，那最可能就是你的蛋白质根本不带电荷或者由于你的前期处理做的不好，蛋白质还是凝聚成团，完全无法通过凝胶介质的空隙。
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3楼2013-04-20 14:29:56
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yc_yihao

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你好，如果跑的是变性胶，因为加的有SDS，所以即是在等电点处蛋白仍带有负电荷。如果是非变性胶，在等电点处蛋白正负电荷相等是不能进行电泳。
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4楼2013-04-20 15:46:28
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panyuzhu

禁虫 (小有名气)
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5楼2013-04-20 21:39:06
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