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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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抹脖丧

新虫 (初入文坛)

[求助] 明明只有一个的酶切位点,为什么切完总是两条带?

构建好的质粒,明明只有一个的酶切位点,为什么切完总是两条带?可能是什么原因呢?百思不得其解,请求各位高人解答。谢谢!
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你用的是什么酶?你参考的序列准确吗?
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-04-10 17:34:39
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genolab

金虫 (著名写手)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
会不会你连接进去的目的DNA里面含有酶切位点?
仔细检查一下。
3楼2013-04-10 17:55:13
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抹脖丧

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-04-10 17:34:39
你用的是什么酶?你参考的序列准确吗?

我用的是AlwNI,载体上只有一个点,连入的片段上没有,本来打算将载体线性化的,可切出来总是两条带
4楼2013-04-11 09:10:02
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wangqi1107

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
载体图谱发过来看看 你连的序列也发过来 380270985  要么你的载体不正确,要么链接序列里有你用的没切位点,把控载体单酶切一下看看是不是一条带   如果链接片段长的话 单酶切一下目的片段 都正确的话 不可能出现上面问题
5楼2013-04-11 09:25:46
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zc10052157

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励应助! 2013-04-11 11:52:34
环状质粒跟线性质粒电泳的速度是不一样的   可能是酶切不充分     可以切不同时间看看两个条带是不是都一样亮
hold住
6楼2013-04-11 09:27:33
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