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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » LPS加入培养皿刺激细胞后的最长有效作用时间？
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ysm1983

新虫 (初入文坛)

[交流] LPS加入培养皿刺激细胞后的最长有效作用时间？ 已有3人参与

RT.请问有大侠知道LPS加入培养基刺激细胞，再放入培养箱，LPS的最长有效作用时间是多少么？
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1楼 2013-04-10 03:07:50
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ququ1105

银虫 (小有名气)
★
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这得看你用的什么细胞了
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2楼2013-04-10 09:31:21
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hanyunfei88

木虫 (初入文坛)
★
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你好，这个要看你是什么细胞，还有用的剂量，但大多数实验在用2h,3h，6h时达到高峰损伤细胞分泌的物质达到高峰。而做动物实验则有不同
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3楼2013-04-10 10:16:36
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ysm1983

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hanyunfei88 at 2013-04-10 10:16:36
你好，这个要看你是什么细胞，还有用的剂量，但大多数实验在用2h,3h，6h时达到高峰损伤细胞分泌的物质达到高峰。而做动物实验则有不同

多谢多谢！可是我要观察的是细胞的凋亡及形态改变，发现作用时间短的话可能还不足以出现凋亡，如果我连续作用72或96小时的话，LPS在这么长的时间内会不会失效呢？而我如果用流式测凋亡的话期间又不能换液，不然的话会丢失已漂浮的凋亡细胞的啊！
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4楼2013-04-10 11:18:35
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hanyunfei88

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4楼: Originally posted by ysm1983 at 2013-04-10 11:18:35
多谢多谢！可是我要观察的是细胞的凋亡及形态改变，发现作用时间短的话可能还不足以出现凋亡，如果我连续作用72或96小时的话，LPS在这么长的时间内会不会失效呢？而我如果用流式测凋亡的话期间又不能换液，不然的话 ...

嗯，我就研究这个一段时间，大多都是研究小鼠模型，关于细胞的文献很少。72或96小时好像不会失效，但细胞可能病变了，他会分泌细胞坏死因子，白细胞介素等，细胞里面结构变化。你降低一下lps浓度应该能坚持那么久吧。
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5楼2013-04-11 17:29:23
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ysm1983

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by hanyunfei88 at 2013-04-11 17:29:23
嗯，我就研究这个一段时间，大多都是研究小鼠模型，关于细胞的文献很少。72或96小时好像不会失效，但细胞可能病变了，他会分泌细胞坏死因子，白细胞介素等，细胞里面结构变化。你降低一下lps浓度应该能坚持那么久吧 ...

呵呵！我养的是A549肺腺癌细胞，现在都用到100ug/ml了，48小时FCM都还没有出现凋亡。。。药的浓度已经不好再加了，所以我想能不能再作用久一些，看能不能出现凋亡。可是不确定LPS在培养基中多久会失效啊。
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6楼2013-04-11 23:17:32
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hanyunfei88

木虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
正常A549 细胞贴壁生长, 呈立方形或长方形,
核为圆形, 胞浆颗粒清晰, 细胞间相互紧密融合, 成
片生长; LPS 作用3h 后细胞结构稍有松散, 可见少
量呈球形的死亡细胞漂浮于培养液中; LPS 作用后
12 h, 死亡细胞占大部分, 只有少量存活的细胞贴壁
生长; 而LPS 作用24 h 后A549 细胞完全死亡, 飘
浮于培养液中, 呈球形, 细胞核溶解, 胞浆与胞核融
合, 整个细胞呈现死亡状态,
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7楼2013-04-12 17:49:21
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ysm1983

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by hanyunfei88 at 2013-04-12 17:49:21
正常A549 细胞贴壁生长, 呈立方形或长方形,
核为圆形, 胞浆颗粒清晰, 细胞间相互紧密融合, 成
片生长; LPS 作用3h 后细胞结构稍有松散, 可见少
量呈球形的死亡细胞漂浮于培养液中; LPS 作用后
12 h, 死亡细胞占 ...

你好！谢谢你的回帖。能把这篇文献发给我看下么？我发现只有在低血清浓度下A549死亡才较明显。而且可能也和LPS的血清型有关吧。
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8楼2013-05-19 17:59:53
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Dengxinyi

禁虫
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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9楼2022-08-12 10:04:13
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