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qiuling

金虫 (小有名气)

[求助] HPLC柱压突然降低20bar,保留减弱7min,但系统没有泄漏,柱压也稳定,是什么问题导致?

色谱柱:Waters XBridge C18;流动相:磷酸盐和乙腈,梯度变化,乙腈比例从25%到40%,柱温25度。前一天压力为170bar,测定样品正常;第二天柱压就突然降低20bar至150bar,保留从23min减至16min,峰形柱效却无明显变化。经排查,系统没有泄漏,柱压150bar也稳定,没有气泡,样品和流动相等都没有什么问题。是什么原因导致柱压突然降低而保留减弱?如果是柱子坍塌,峰形柱效为何无明显变化?希望高手答疑!非常感谢!
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哎呀呀小丫丫

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
qiuling: 金币+2, 有帮助 2013-04-10 12:49:51
qiuling: 金币+1 2013-04-10 12:52:12
使用磷酸盐缓冲液前,应当先用水/乙腈将系统平衡,之后再换上磷酸盐,否则盐析出,阻塞单向阀,导致压力偏低。将柱子取下,磷酸盐溶液换成水冲洗一下管路。
7楼2013-04-10 11:37:48
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djjreal

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
qiuling: 金币+2, 有帮助 2013-04-10 10:49:05
不知道你的液相具体发生了什么,如果只是两天比较的话,你看看在你做之前是不是做过什么,系统没有充分平衡也有可能造成柱压跟保留时间变化,保留时间改变那么多?两天的流动相是不是同一瓶的
我倒是有个问题,梯度的柱压在25%到40%的过程中保持不变的吗?
2楼2013-04-10 09:56:08
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cpuliuwei

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
qiuling: 金币+2, 有帮助 2013-04-10 10:49:42
泵流量不准或有机相的那个泵流量不准,一般是轻微污染了。
3楼2013-04-10 10:15:44
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qiuling

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by djjreal at 2013-04-10 09:56:08
不知道你的液相具体发生了什么,如果只是两天比较的话,你看看在你做之前是不是做过什么,系统没有充分平衡也有可能造成柱压跟保留时间变化,保留时间改变那么多?两天的流动相是不是同一瓶的
我倒是有个问题,梯度 ...

流动相是同一瓶,系统充分平衡。两天之间这根柱子没有做过其他的试验。我提到的柱压变化指的是25%时的压力变化(两天之间),40%是随着梯度变化的,在这我就没提了。谢谢您!
4楼2013-04-10 10:48:55
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