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diandianyuyu

金虫 (小有名气)

[求助] 急!待毕业!使用ELISA检测血清中抗体滴度,包被时的抗原可以不与载体蛋白偶联吗?

题目有点长,我把问题再仔细说一下:
本实验室自己合成了一种蛋白G的并列体二聚物,然后用OVA和这种并列体二聚物偶联形成抗原免疫大鼠。我想使用ELISA的方法检测血清中G蛋白的抗体滴度。
问题是:包被时,包被抗原有什么要求?是必须和免疫抗原一样吗?G蛋白的单体可以当做包被抗原吗?G蛋白包被时对偶联的大分子载体有什么要求?
谢谢大家!
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

上文的参考文献:C.Kleanthous edits,Protein-Protein Recognition,Oxford University Press,2000,P10-13.
M.R.Wikins etal.,Proteome Research,Springer,2007,P30-36.

另外,半抗原与BSA等连接蛋白共价连接之后,可能半抗原的原有的免疫反应性会发生改变。参见:
1.Robert M. MacCallum, Andrew C. R. Martin , Janet M. Thornton. Antibody-antigenInteractions: Contact Analysis and Binding Site Topography.J. Mol. Biol. 1996,262:732–745 ,
2.Helena Persson, Johan Lantto,Mats Ohlin. A Focused Antibody Library for Improved Hapten Recognition.J. Mol. Biol. 2006,357, 607–620 ,
3.Lucy C. Harris , Paul J. Davis , David C. James. Fatty acids as haptens: exploring the limits of antigenicity. Molecular Immunology, 2003 ,40: 381–389 。
10楼2013-04-16 00:01:39
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diandianyuyu

金虫 (小有名气)

自己顶一下!悬赏100啊~~~请大家帮忙解答一下吧~~谢了
2楼2013-04-08 20:21:56
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kx444555

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
diandianyuyu: 金币+100 2013-04-09 21:10:13
一般说来,不需要与与载体蛋白偶联,我们包被多肽时也不偶联的,只有ELISA出现白板时才与大蛋白相偶联,当然这是极少出现的情况
星陈代谢
3楼2013-04-08 22:06:46
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diandianyuyu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by kx444555 at 2013-04-08 22:06:46
一般说来,不需要与与载体蛋白偶联,我们包被多肽时也不偶联的,只有ELISA出现白板时才与大蛋白相偶联,当然这是极少出现的情况

谢谢哦!那再请问一下,如果需要偶联时,是必须要用OVA还是不能用OVA呢?OVA是我给动物免疫时的载体蛋白。
4楼2013-04-09 00:01:41
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