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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » Griess试剂测巨噬细胞NO含量
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yunpei-89

新虫 (初入文坛)

[求助] Griess试剂测巨噬细胞NO含量

我最近在做Griess试剂测细胞炎症反应产生的NO含量，用的6孔板，一般吸光度值做到0.2-0.4之间。做标曲的话用100uL 100umol/L的NaNO2与等体积Griess试剂反应也只做到0.9的吸光度值，所以细胞反应中的响应值变动范围相对就比较低。后来换用了碧云天的试剂盒，原理也是Griess试剂反应，按它上面的最大量50uL 100umol/L的NaNO2与100uLGriess试剂反应，（终浓度33.3umol/L）,吸光度值做到0.5多，我想继续往下面做，但老师说这样做误差太大，让我找原因，但试了很久都差别不大。想问下大家做的反应响应值大致都是多少的，如果都是这样我就不在这上面耗时间了。拜谢。
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1楼 2013-04-08 16:36:06
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yunpei-89

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by bosir at 2013-05-22 11:56:33
你是 普通培养基没有用血清 还是用的培养可以用的无血清培养基，如果是普通培养基 不加血清，可能细胞已经处于应激状态了，NO可能已经有变化了，你可以直接试试有血清的，或者说血清对你实验其他问题影响比较大，可 ...

好的，真的受益很多。我不知道还有培养用的无血清培养基，我就直接用的加双抗的基础培养基来做了。真心谢谢您。
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8楼2013-05-27 17:09:06
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bosir

木虫 (小有名气)

嘻嘻

【答案】应助回帖

我们用哪个promega做的话，吸光度相对都比较低，要做四个平行，效果还行，碧云天的货常出问题啊
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嘻嘻
2楼2013-04-12 21:38:54
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yunpei-89

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bosir at 2013-04-12 21:38:54
我们用哪个promega做的话，吸光度相对都比较低，要做四个平行，效果还行，碧云天的货常出问题啊

谢谢您的关注，不好意思，我不太明白您说的promega是什么？另外，前辈的专业是做细胞的，想请教一下，在这个实验中哪些因素可能有干扰。比如培养基含不含酚红，还有培养基中有的含丙酮酸钠等。我觉得我的平行做的不是很好，现在在做不同浓度脂多糖致炎，做的不同平行，NO变化趋势就不太一样。期待您的回复。
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3楼2013-05-12 21:45:03
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bosir

木虫 (小有名气)

嘻嘻

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
yunpei-89: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-05-19 23:06:11
引用回帖:
3楼: Originally posted by yunpei-89 at 2013-05-12 21:45:03
谢谢您的关注，不好意思，我不太明白您说的promega是什么？另外，前辈的专业是做细胞的，想请教一下，在这个实验中哪些因素可能有干扰。比如培养基含不含酚红，还有培养基中有的含丙酮酸钠等。我觉得我的平行做的不 ...

promega是一氧化氮试剂盒的牌子，进口的，效果还比较好。我们做骨髓来源巨噬细胞，用LPS刺激的阳性对照上升时比较明显的，而且你说的培养基，没什么影响的啦。
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嘻嘻
4楼2013-05-14 13:33:32
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