应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助师兄师姐~有关于巢式PCR的问题~~help
51/1返回列表
查看: 2592  |  回复: 11
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

gissingtan

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助师兄师姐~有关于巢式PCR的问题~~help

最近在做巢式PCR，请问有经验的师兄师姐，你们第一次PCR的产物需要做什么处理才作为第二次PCR的模板？
我听师姐说直接切胶，放-20℃过夜，12000rpm离心10min，取上清液做模板，不知是否合理，我自己尝试了一下，跑胶检测没有条带。
我想请教：
1、第一次PCR产物是怎么处理，再作为第二次PCR的模板
2、我做的方法是否正确，如果正确，为什么检测没有条带
谢谢大家了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2013-04-07 15:52:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gissingtan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by czfscf at 2013-04-07 20:35:21
第一次pcr产物少量经过电泳检测扩出来了就行，然后直接再拿这个做模板扩下一个

但是我第一次p出的条带多，需要其中的一个条带才做的巢式PCR啊
赞一下 回复此楼
6楼2013-04-07 20:53:07
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

zhangquan084

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
最近正打算做抑制性消减杂交，要用到巢式PCR，可以交流一下。
赞一下 回复此楼
生而不息，奋斗不止！
2楼2013-04-07 17:19:27
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gissingtan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangquan084 at 2013-04-07 17:19:27
最近正打算做抑制性消减杂交，要用到巢式PCR，可以交流一下。

好的~请问你知道巢式PCR具体操作过程吗？
赞一下 回复此楼
3楼2013-04-07 17:33:20
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangquan084

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

不太清楚，最近也刚在学。只知道原理！
赞一下 回复此楼
生而不息，奋斗不止！
4楼2013-04-07 17:48:15
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭