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laozuzunzhe

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[求助] 细胞碎片中蛋白的提取测定方法

在细胞蛋白测定实验中，我打算用细胞破碎后，没溶解的碎片中疏水蛋白跑电泳，大概记得有一个蛋白手册上有相关处理方法，好像是用一种蛋白酶来裂解，现在找不到了，麻烦谁清楚这个实验过程的，或是有该实验文档的指导一下。非常感谢！！！

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1楼 2013-03-30 10:46:02

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tianchi2952

铜虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

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什么细胞，动植物还是微生物细胞，还有真核原核细胞膜蛋白的提取方法是不同的......你这试验是什么目的，目的不同方法也不同.......麻烦问的专业一点哈......
如果纯化膜蛋白还要保持其高级结构和活性的话就麻烦一些，如果只是将它裂解消化掉那就容易多了......

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益学善用

2楼2013-03-30 11:38:59

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laozuzunzhe

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引用回帖:

2楼: Originally posted by tianchi2952 at 2013-03-30 11:38:59
什么细胞，动植物还是微生物细胞，还有真核原核细胞膜蛋白的提取方法是不同的......你这试验是什么目的，目的不同方法也不同.......麻烦问的专业一点哈......
如果纯化膜蛋白还要保持其高级结构和活性的话就麻烦一 ...

要大肠杆菌超声破碎后碎片中的蛋白，我要分析离心后，沉淀的碎片中和上清中蛋白的变化，需要跑电泳，但是现在不知道怎么处理碎片来得到蛋白，我记得好像是用酶处理，在冰上做的。你知道详细的具体步奏或能提供一个操作步奏不？谢谢